[发明专利]全人源抗登革病毒单克隆抗体、制备方法及用途有效
申请号: | 201811201785.3 | 申请日: | 2018-10-16 |
公开(公告)号: | CN109456408B | 公开(公告)日: | 2021-08-03 |
发明(设计)人: | 胡适;崔瀛书;雷长海;傅文燕;李天 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第二军医大学 |
主分类号: | C07K16/10 | 分类号: | C07K16/10;C12N15/13;C12N15/85;A61K39/42;A61K45/06;A61P31/14 |
代理公司: | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人: | 赵青 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 全人 源抗登革 病毒 单克隆抗体 制备 方法 用途 | ||
1.一种全人源抗登革病毒单克隆抗体,其特征在于,由两条完全相同的重链及两条完全相同的轻链组成,所述重链的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.编码权利要求1所述的全人源抗登革病毒单克隆抗体的核苷酸,其特征在于,编码所述重链的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,编码所述轻链的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
3.表达权利要求2所述的编码全人源抗登革病毒单克隆抗体的核苷酸的表达载体,其特征在于,表达所述重链核苷酸的载体为pCDNA3.1,该表达载体上含有重链核苷酸序列以及与核酸分子的序列操作性相连的表达调控序列;表达所述轻链核苷酸的载体为pcDNA3.1Zeo,该表达载体上含有轻链核苷酸序列以及与核酸分子的序列操作性相连的表达调控序列。
4.权利要求1所述的全人源抗登革病毒单克隆抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
A. 全基因合成单克隆抗体的重链和轻链基因,并将两条重链和两条轻链基因分别装入真核表达载体pcDNA3.1和pcDNA3.1Zeo内,作为重链表达载体和轻链表达载体;
B. 将所述重链表达载体和所述轻链表达载体一起用脂质体法转染宿主细胞,培养宿主细胞后,用含500μg/ml G418和300μg/ml Zeocin的选择培养基筛选稳定表达全人源抗登革病毒单克隆抗体的细胞克隆,利用Protein A柱通过亲和层析从细胞培养物的上清中纯化抗体。
5.根据权利要求4所述的全人源抗登革病毒单克隆抗体的制备方法,其特征在于:
其中,所述宿主细胞为哺乳动物细胞、昆虫宿主细胞或原核细胞。
6.含有权利要求1所述的全人源抗登革病毒单克隆抗体的抗登革病毒感染的药物组合物,其特征在于,还包括药学上可接受的辅料。
7.根据权利要求6所述的抗登革病毒感染的药物组合物,其特征在于:
其中,所述药物组合物为水针或冻干制剂,
所述药学上可接受的辅料包括表面活性剂、溶液稳定剂、等渗调节剂和缓冲液之一或组合。
8.权利要求1所述的全人源抗登革病毒单克隆抗体在制备抗登革病毒感染药物中的用途。
9.根据权利要求8所述的全人源抗登革病毒单克隆抗体在制备抗登革病毒感染药物中的用途,其特征在于,还包括和其他抗登革病毒感染药物联合使用。
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