[发明专利]一种可检测活细胞内金属离子的荧光检测探针

权利要求书

1.一种可检测活细胞内金属离子的荧光检测探针，其特征在于，是修饰有巯基化DNA4的AuNRs@Pt二聚体、修饰有巯基化DNA7的上转换纳米粒子，与荧光基因修饰的DNA3、荧光基因修饰的DNA5、荧光淬灭基团TAMRA修饰的DNA6以及DNA8的混合孵育物；所述修饰有巯基化DNA4的AuNRs@Pt二聚体是AuNRs@Pt-DNA1以及AuNRs@Pt-DNA2的孵育物；

所述DNA1为与DNA2的活性部位互补或部分互补的序列；

所述DNA2为锌离子特异性DNA酶；

所述DNA3为与DNA2的非活性部位互补或部分互补的序列；

所述DNA4为镁/铜离子特异性DNA酶；

所述DNA5为与DNA4的活性部位互补或部分互补的序列；

所述DNA6为与DNA4的非活性部位互补或部分互补的序列；

所述DNA7为与DNA4的非活性部位互补或部分互补的序列；

所述DNA8为与DNA4的活性部位互补或部分互补的序列。

2.如权利要求1所述的一种可检测活细胞内金属离子的荧光检测探针，其特征在于，所述DNA1的核苷酸序列为SEQ ID NO.1；所述DNA2的核苷酸序列为SEQ ID NO.2；所述DNA3的核苷酸序列为SEQ ID NO.3；所述DNA4的核苷酸序列为SEQ ID NO.4；所述DNA5的核苷酸序列为SEQ ID NO.5；所述DNA6的核苷酸序列为SEQ ID NO.6；所述DNA7的核苷酸序列为SEQID NO.7；所述DNA8的核苷酸序列为SEQ ID NO.8。

3.如权利要求1所述的一种可检测活细胞内金属离子的荧光检测探针，其特征在于，所述荧光检测探针的制备方法为将铂包裹的金纳米棒溶液与巯基聚乙二醇溶液混合后进行反应，得到金纳米棒-聚乙二醇复合物溶液；将金纳米棒-聚乙二醇复合物溶液分成两份，将两份金纳米棒-聚乙二醇复合物溶液分别与巯基化的DNA1、巯基化的DNA2混合后进行孵育，得到金纳米棒-聚乙二醇-DNA1复合物溶液以及金纳米棒-聚乙二醇-DNA2复合物溶液；将AuNRs@Pt-DNA1溶液以及AuNRs@Pt-DNA2溶液混合并进行反应，反应结束后，再与巯基化的DNA4混合并进行反应，得到修饰有巯基化DNA4的AuNRs@Pt二聚体溶液；将上转换纳米粒子溶液与Tris-HCl缓冲液混合后，将混合得到的混合液与巯基化的DNA7混合并进行孵育，得到修饰有巯基化DNA7的上转换纳米粒子溶液；将修饰有巯基化DNA4的AuNRs@Pt二聚体溶液与修饰有巯基化DNA7的上转换纳米粒子溶液混合后，将混合得到的混合液与荧光基因修饰的DNA3、DNA5、荧光淬灭基团TAMRA修饰的DNA6以及DNA8混合并进行孵育，得到可检测活细胞内金属离子的荧光检测探针溶液。

4.如权利要求2所述的一种可检测活细胞内金属离子的荧光检测探针，其特征在于，所述荧光检测探针的制备方法为将铂包裹的金纳米棒溶液与巯基聚乙二醇溶液混合后进行反应，得到金纳米棒-聚乙二醇复合物溶液；将金纳米棒-聚乙二醇复合物溶液分成两份，将两份金纳米棒-聚乙二醇复合物溶液分别与巯基化的DNA1、巯基化的DNA2混合后进行孵育，得到金纳米棒-聚乙二醇-DNA1复合物溶液以及金纳米棒-聚乙二醇-DNA2复合物溶液；将AuNRs@Pt-DNA1溶液以及AuNRs@Pt-DNA2溶液混合并进行反应，反应结束后，再与巯基化的DNA4混合并进行反应，得到修饰有巯基化DNA4的AuNRs@Pt二聚体溶液；将上转换纳米粒子溶液与Tris-HCl缓冲液混合后，将混合得到的混合液与巯基化的DNA7混合并进行孵育，得到修饰有巯基化DNA7的上转换纳米粒子溶液；将修饰有巯基化DNA4的AuNRs@Pt二聚体溶液与修饰有巯基化DNA7的上转换纳米粒子溶液混合后，将混合得到的混合液与荧光基因修饰的DNA3、DNA5、荧光淬灭基团TAMRA修饰的DNA6以及DNA8混合并进行孵育，得到可检测活细胞内金属离子的荧光检测探针溶液。