[发明专利]一种基于气相色谱-串联质谱的烟叶中草甘膦残留的定量分析方法

说明书

本发明公开基于气相色谱‑串联质谱的烟叶中草甘膦残留的定量分析方法，称取烟叶样品至具盖离心管，移取高纯水，超声波辅助萃取，离心取上清液离心浓缩去溶剂，然后依次加入吡啶和衍生化试剂MSTFA，水浴衍生30 min，衍生完常温放置2 h，得待测样品；配制草甘膦混合标准溶液，通过气相色谱‑串联质谱分析，得校准曲线方程和线性相关系数；将待测样品进行气相色谱‑串联质谱分析，得待测样品中草甘膦的色谱质谱峰面积，输入校准曲线方程计算到相对应的物质浓度。本发明烟叶中草甘膦分析的回收率在95.1～103.5%、检测下限为4 mg/kg、定量下限为10 mg/kg、日内重复性为3.53%，日间重复性为5.16%。

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，具体涉及一种基于气相色谱-串联质谱的烟叶中草甘膦残留的定量分析方法。

背景技术

草甘膦(glyphosate，Gly)，化学名称N-(膦酰基甲基)氨基乙酸，是目前世界上应用最广、生产量最大的广谱非选择性除草剂，可有效去除多种杂草及灌木，是目前世界上应用最广、生产量最大的除草剂之一。草甘膦及其主要代谢物氨甲基膦酸具有与有机磷化合物相似的作用毒理，主要通过抑制胆碱脂酶的活性而导致神经系统机能失调。草甘膦是世界卫生组织国际癌症研究机构公布（2017年）的2A类致癌物，不合理使用会导致植物产品中的草甘膦残留超标，影响消费者安全。草甘膦分子中含有一个羧基和一个磷酸基，属于极性小分子弱挥发性化合物，在反相液相色谱柱上保留较差，而由于其挥发性较弱，也不宜直接用气相色谱分析，且缺少发色团和荧光团等物理化学性质，使得对草甘膦残留量的检测具有一定的挑战性。

烟叶在种植、生产加工和储存过程中，避免不了农药的使用，因而造成相关农药在烟叶上的残留。由于烟草成分复杂，干扰物质多，因此测定食品及茶叶中一种或几种农药残留量的方法不能完全适用于烟草的测定。国内外对于烟草中农药残留的分析报道中，检测方法多为气相色谱法（GC）、气相色谱－质谱联用法（GC-MS）和液相色谱法（HPLC）、毛细管电泳法、液相色谱质谱法等，其中样品前处理方法多为索氏提取、超临界流体萃取、微波辅助提取、加速溶剂萃取（ASE）、固相萃取（SPE）法及德国官方规定的通用于检测食品中农药残留量的S-19方法等。这些方法中样品的萃取、纯化和衍生是决定方法的效果和操作难度的关键，但处理过程中大多存在操作费时、溶剂消耗多、样品用量大、灵敏度低、重复性差等缺点，不适合大批量样品的检测。

发明内容

本发明针对现有技术存在的问题及不足，提供了一种基于气相色谱-串联质谱的烟叶中草甘膦残留的定量分析方法。

本发明是这样实现的：包括样品前处理、标准曲线绘制、样品分析步骤，具体包括：

A、样品前处理：称取10 mg烤后烟叶样品或100 mg新鲜烟叶样品至1.5 mL具盖离心管，移取1 mL高纯水，超声波辅助萃取30 min，离心，取上清200 μL离心浓缩去溶剂，去溶剂后样品依次加入100 μL吡啶和100 μL衍生化试剂MSTFA，75℃下水浴衍生30 min，衍生完的样品常温放置2 h，得到待测样品；

B、标准曲线绘制：配制草甘膦混合标准溶液，通过气相色谱-串联质谱进行分析，拟合得到校准曲线方程和线性相关系数；

C、样品分析：将A步骤处理后的待测样品进行气相色谱-串联质谱分析，得到待测样品中草甘膦的色谱质谱峰面积，输入B步骤得到的校准曲线方程，计算得到相对应的物质浓度。

本发明与现有技术相比具有以下有益效果：

1、本发明的样品前处理流程简单，仅包括提取、冻干、衍生三步，与现有技术相比，无需样品纯化步骤，本发明整体操作简单且快速、溶剂消耗少、样品用量小，适合大批量样品的检测。