[发明专利]一种基于气相色谱-串联质谱的烟叶中草甘膦残留的定量分析方法

权利要求书

1.一种基于气相色谱-串联质谱的烟叶中草甘膦残留的定量分析方法，其特征在于，包括样品前处理、标准曲线绘制、样品分析步骤，具体包括：

A、样品前处理：称取10mg烤后烟叶样品或100mg新鲜烟叶样品至1.5mL具盖离心管，移取1mL高纯水，以25~45kHz频率进行超声波辅助萃取30min，离心，取上清200μL离心浓缩去溶剂，离心浓缩去溶剂的过程中冻干机压力＜1bar、离心机转速为600rpm、离心时间为90~120min；去溶剂后样品依次加入100μL吡啶和100μL衍生化试剂MSTFA，75℃下水浴衍生30min，衍生完的样品常温放置2h后得到待测样品；

B、标准曲线绘制：配制草甘膦混合标准溶液，通过气相色谱-串联质谱进行分析，拟合得到校准曲线方程和线性相关系数；

C、样品分析：将A步骤处理后的待测样品进行气相色谱-串联质谱分析，得到待测样品中草甘膦的色谱质谱峰面积，输入B步骤得到的校准曲线方程，计算得到相对应的物质浓度；

B、C步骤中色谱分析条件为：30m×0.25mm×0.25μm的DB-5MS色谱柱，程序升温条件为从100℃开始，以25℃/min升至280℃，保持3min；进样口温度为280℃；进样体积为1μL；载气为氦气；柱流量为1.0mL/min；分流比为20:1；

B、C步骤中质谱分析条件为：传输线温度为260℃，离子源温度为230℃，溶剂延迟时间为3min，多反应离子检测的离子对1和离子对2分别为340.1-299.1和312.1-297.1，碰撞能量均为12V。

2.根据权利要求1所述的定量分析方法，其特征在于，所述A步骤中的新鲜烟叶样品为新鲜烟叶粉末，所述新鲜烟叶粉末的制备方法为：将新鲜烟叶样品在液氮冷冻下研磨粉碎至小于40目，磨好样品迅速转入离心管封存于-80℃冰箱，备用。

3.根据权利要求2所述的定量分析方法，其特征在于，所述新鲜烟叶样品置于研钵或低温自动研磨仪内在液氮冷冻下研磨粉碎。

4.根据权利要求1所述的定量分析方法，其特征在于，所述A步骤中的烤后烟叶样品为烤后烟叶粉末，所述烤后烟叶粉末的制备方法为：将烤后烟叶样品研磨粉碎至小于40目，磨好样品转入离心管封存于4℃冰箱，备用。

5.根据权利要求1所述的定量分析方法，其特征在于，所述B步骤是以水为溶剂，配置10μg/mL的草甘膦混合标准溶液，然后分别移取10、20、40、60、80、100、200μL标准混合溶液至1.5mL离心管，真空冷冻离心除去离心管中溶剂水，再分别称取10mg烤后或100mg新鲜空白烟末至离心管作为样品基质，制成10、20、40、60、80、100、200mg/kg浓度梯度的待测样本；然后将待测样本分别按A步骤的萃取衍生处理，再转至C步骤的气相色谱-串联质谱进行分析，得到每个浓度梯度样本对应的色谱质谱峰面积，将得到的峰面积和其对应的浓度梯度进行线性拟合，得到校准曲线方程和线性相关系数。

6.根据权利要求5所述的定量分析方法，其特征在于，所述真空冷冻离心除去离心管中溶剂水过程中的真空度＜1bar、离心机转速为600rpm、离心时间为90~120min。

7.根据权利要求1所述的定量分析方法，其特征在于，所述C步骤中计算的结果以重复性条件下获得的至少两次独立测定结果的算术平均值表示。