[发明专利]一种包含疏松层的脱细胞生物羊膜及其制备方法

说明书

本发明提供了一种包含疏松层的脱细胞生物羊膜及其制备方法，属于生物羊膜及制备工艺领域。本发明提供的包含疏松层的包含疏松层的脱细胞生物羊膜的制备方法，经过了脱细胞、病毒灭活等步骤，在保证其安全性的前提下，该羊膜产品的天然结构完整的保留，并且使其疏松层也完整的保留，并且疏松层内不含细胞，最大限度的保留其抗炎和修复的生长因子的生物活性，减少这些生长因子的流失，从而使其修复和抗炎功能大大提高，使其在治疗皮肤损伤修复和抗炎的作用上较一般的脱细胞羊膜制品的疗效更好，降低了其免疫原反应，并且经过了病毒灭活，提高了安全性，保障了该羊膜在临床上使用的安全性，并且效果好。

技术领域

本发明涉及生物羊膜及制备工艺领域，具体而言，涉及一种包含疏松层的脱细胞生物羊膜及其制备方法。

背景技术

人羊膜来源于胎盘的最内层，主要由上皮细胞层、基底膜、致密层、纤维母细胞层及海绵层组成，上皮细胞层为单层上皮细胞，基底膜主要成分为Ⅲ型胶原、Ⅳ型胶原及非胶原成分(laminin，nidogen，fibronectin)，利于细胞粘附；致密层为网状纤维结构组成之一，含有Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原组成束状结构，以及Ⅴ型胶原、Ⅵ胶原组成细丝状结构，束状结构有利于维持羊膜机械性能，而细丝状结构与基底膜连接；纤维母细胞层为疏松胶原网状结构，并含有纤维母细胞以及非胶原成分(糖蛋白)，通常也被叫作疏松层。海绵层为非纤维的网状结构，含有Ⅲ型胶原、蛋白聚糖以及糖蛋白。

新鲜羊膜和冷藏羊膜总确实能最大程度保留各种胶原和活性因子成分，但这类羊膜未经病毒灭活、脱细胞等处理，存在病毒传播和免疫原性等安全隐患，并且完整的新鲜羊膜含有的成分复杂，一些结构或者成分可能阻碍羊膜的功效，在临床应用的效果不一定就好；现有的经过病毒灭活、脱细胞、去垢等处理后的羊膜一般只包含基底膜和致密层，因为疏松层结构疏松，在处理的过程中容易被破坏去掉，并且其促进细胞增殖和抗炎的一些因子损失大，使其修复和抗炎效果大大降低。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种脱细胞生物羊膜，该生物羊膜完整的保留了其疏松层结构，能大幅度提高羊膜的抗炎功能。

本发明的第二目的在于提供一种包含疏松层的脱细胞生物羊膜的制备方法，该方法能通过简单的步骤、较短的时间、温和的条件制备得到脱细胞生物羊膜。

为了实现本发明的上述目的，采用以下技术方案：

一种包含疏松层的脱细胞生物羊膜，脱细胞生物羊膜的结构包括基底膜、致密层、疏松层。

一种包含疏松层的脱细胞生物羊膜的制备方法，包括以下步骤：

用过氧乙酸-氯化钠溶液对经清洗的生物羊膜进行病毒灭活，得到灭活羊膜；

用生理盐水震荡清洗灭活羊膜并震荡清洗，用碳酸氢钠溶液复洗，得到复洗羊膜；

将蛋白酶液和复洗羊膜混合孵育，并纯净水震荡清洗，并用去垢液震荡清洗后，制备得到脱细胞生物羊膜。

与现有技术相比，本发明的有益效果包括：本发明提供的包含疏松层的脱细胞生物羊膜的制备方法，经过了脱细胞、病毒灭活等步骤，在保证其安全性的前提下，该羊膜产品的天然结构完整的保留，并且使其疏松层也完整的保留，并且疏松层内不含细胞，最大限度的保留其抗炎和修复的生长因子的生物活性，减少这些生长因子的流失，从而使其修复和抗炎功能大大提高，使其在治疗皮肤损伤修复和抗炎的作用上较一般的脱细胞羊膜制品的疗效更好，降低了其免疫原反应，并且经过了病毒灭活，提高了安全性，保障了该羊膜在临床上使用的安全性，并且效果好。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。