[发明专利]以MSLN为靶点的嵌合抗原受体

权利要求书

1.一种以MSLN为靶点的嵌合抗原受体，其由N端到C端顺次包括抗原结合区、跨膜共刺激结构域、T细胞信号传导区功能结构域以及共表达的Runx3 激动因子；

所述抗原结合区具有的重链互补决定区CDR-VH1、CDR-VH2、CDR-VH3的序列依次如SEQID NO:1~3所示，轻链互补决定区CDR-VL1、CDR-VL2、CDR-VL3的序列依次如SEQ ID NO:4~6所示；

所述Runx3 激动因子的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示。

2.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述跨膜共刺激结构域选自CD27，CD28，4-1BB，OX40，CD30，CD40，PD-1，LFA-1，CD2，CD7，LIGHT，NKG2C，B7-H3 蛋白分子的共刺激信号传导区、与CD3ζ特异性结合的配体或其任意组合。

3.根据权利要求2所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述跨膜共刺激结构域选自CD28与4-1BB。

4.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述抗原结合区选自人抗体、人源化抗体或嵌合抗体；或上述抗体类型的具有抗原结合活性的功能片段。

5.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述抗原结合区的重链骨架区序列依次如SEQ ID NO:8~11所示，轻链骨架区序列依次如SEQ ID NO:12~15所示。

6.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述抗原结合区选自scFv。

7.根据权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述T细胞信号传导区功能结构域选自PKCθ、FcεRIγ、ZAP70或CD3ζ或其任意组合。

8.根据权利要求7所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述T细胞信号传导区功能结构域选自CD3ζ。

9.一种分离的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子为DNA或RNA，其编码权利要求1~8任一项所述的嵌合抗原受体。

10.一种载体，其包含权利要求9所述的核酸分子。

11.根据权利要求10所述的载体，其特征在于，所述载体为逆转录载体。

12.根据权利要求11所述的载体，其特征在于，所述载体为慢病毒。

13.一种宿主细胞，其被权利要求10所述的载体转化。

14.根据权利要求13所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为T细胞、NK细胞、CIK细胞、DC-CIK细胞。

15.一种制备CAR修饰的细胞的方法，其特征在于，所述方法包括：将权利要求9所述的核酸分子、或权利要求10所述的载体导入待修饰的细胞内，从而获得所述CAR修饰的细胞。

16.根据权利要求15所述的制备CAR修饰的细胞的方法，其特征在于，所述CAR修饰的细胞为T细胞、NK细胞、CIK细胞、DC-CIK细胞。

17.权利要求10所述的载体、或权利要求13所述的宿主细胞在制备用于治疗MSLN阳性实体瘤的治疗剂中的应用；

所述MSLN阳性实体瘤为乳腺癌。

18.一种药物组合物，所述组合物含有药学上可接受的载体以及权利要求10所述的载体、或权利要求13所述的宿主细胞。