[发明专利]聚磺基甜菜碱包载的蛋白纳米微囊及其制备方法

说明书

本发明提供聚磺基甜菜碱包载的蛋白纳米微囊及其制备方法，将蛋白溶液和N‑(3‑氨基丙基)甲基丙烯酸盐单体混合均匀后，再向上述溶液中加入磺基甜菜碱单体，在搅拌的条件下，加入交联剂，利用静电作用和氢键作用，使得N‑(3‑氨基丙基)甲基丙烯酸盐单体、磺基甜菜碱单体和交联剂聚集在蛋白周围，再向上述溶液中加入催化剂和引发剂，通过原位聚合的方法，最终制备得到聚磺基甜菜碱包载的蛋白纳米微囊。本发明利用纳米微囊增加了蛋白在血液中的稳定性，增长循环时间，降低了蛋白和药物本身的毒性，具有高效的抗蛋白吸附作用，极大的改善了蛋白和药物的免疫问题，并降低了功能蛋白对正常组织的毒副作用，具有较好的转染能力。

技术领域

本发明涉及生物医用材料技术领域，更具体地说涉及一种聚磺基甜菜碱包载的蛋白纳米微囊及其制备方法。

背景技术

胶质母细胞瘤作为恶性程度最高的肿瘤，弥散性极强，传统的手术摘除作为一种常用的治疗方式，然而实施手术过程危险性很高，对于一些深层次的肿瘤部位并不能完全摘除，且手术后5年生存率小于10％，生存期不超过15个月，使得胶质母细胞瘤的治疗效果不尽人意。

随着生物分子领域的发展，纳米给药技术为胶质瘤的治疗带来新的发展方向。纳米给药系统主要指几纳米到几百纳米的一类药物递释系载体，纳米微粒为显像与药物治疗提供了非常有前途的平台，在诊疗学中发挥着越发重要的作用。然而传统的纳米微粒在临床和医学应用中有一个很致命的障碍，即纳米微粒易吸附蛋白，引起调理素作用，接着被巨噬细胞吞噬清除，从而大大降低了其药物疗效。蛋白吸附是免疫反应的第一个阶段，考虑怎么对纳米微粒进行修饰，增加其抗蛋白吸附能力，以增加药物在体内的药理作用，这成为纳米给药技术中的关键一步。

随着分子生物学的发展，两性离子成为大家的研究热点，其中磺基甜菜碱{[2-(甲基丙烯酰基氧基)乙基]二甲基-(3-磺酸丙基)氢氧化铵}作为一种两性离子，其电荷平衡作用以及水化能力使其成为一种抗蛋白吸附能力极好的医用材料。Wei等利用原子转移自由基聚合方法在金上接枝上一层磺基甜菜碱膜，与人类血清和血浆共孵育，并证明其具有很好的抗蛋白吸附能力；Chen等利用等离子体诱导法在聚丙烯膜上接枝磺基甜菜碱，发现具有良好的抗蛋白吸附能力，并具有抗凝血和抗血栓作用；Zhai等利用点击化学反应合成了聚己内酯-聚二乙氨乙基甲基丙烯酸甲酯-聚磺基甜菜碱三嵌段共聚物胶束，作为姜黄素的药物载体，利用磺基甜菜碱的生物相容性与抗蛋白吸附性，使其具有良好的缓释效果。

发明内容

本发明克服了现有技术中的不足，提供了一种聚磺基甜菜碱包载的蛋白纳米微囊及其制备方法，利用磺基甜菜碱制备具有抗蛋白吸附能力与转染能力涂层的纳米微囊，在一些与血液相接触的材料、药物载体方面具有重要的作用，本发明可包载多种蛋白与药物，作为一种载体，大大拓宽了生物医用方向的应用领域。

本发明的目的通过下述技术方案予以实现。

聚磺基甜菜碱包载的蛋白纳米微囊及其制备方法，将蛋白溶液和N-(3-氨基丙基)甲基丙烯酸盐单体混合均匀后，再向上述溶液中加入磺基甜菜碱单体，在搅拌的条件下，加入交联剂，利用静电作用和氢键作用，使得N-(3-氨基丙基)甲基丙烯酸盐单体、磺基甜菜碱单体和交联剂聚集在蛋白周围，再向上述溶液中加入催化剂和引发剂，在4-40℃下，通过原位聚合的方法反应0.1-48h，最终制备得到聚磺基甜菜碱包载的蛋白纳米微囊；其中，蛋白、N-(3-氨基丙基)甲基丙烯酸盐单体和磺基甜菜碱单体的摩尔比为1：(50-200)：(3000-9000)，蛋白和交联剂的摩尔比为1：(50-4000)，蛋白、催化剂和引发剂的摩尔比分别为1：(50-3000)：(50-6000)，聚磺基甜菜碱壳层厚度为1-10nm,聚磺基甜菜碱包载的蛋白纳米微囊的直径为7-30nm。

蛋白溶液采用尼妥珠单抗，西妥昔单抗，PDL-1单抗和牛血清白蛋白中的一种。

蛋白溶液、N-(3-氨基丙基)甲基丙烯酸盐单体和磺基甜菜碱单体的摩尔比为1：(100-200)：(4000-8000)。