[发明专利]一种检测巨细胞病毒IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及一种检测巨细胞病毒IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒及其制备方法，属于免疫分析技术领域。本发明的试剂盒包括校准品；R1试剂；R2试剂；R3试剂；R1试剂为磁珠包被CMV抗原；R2试剂为吖啶酯标记的抗人IgG抗体；R3试剂为项目稀释液。本发明还提供试剂盒的制备方法。本发明提供的化学发光免疫分析测定试剂盒用于检测巨细胞病毒IgG抗体，其检测方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好、检测范围广、成本相对较低的优点，可广泛用于临床检测。解决了现有的常用巨细胞病毒IgG抗体检测方法如RIA存在放射性污染、标记物半衰期短、对操作者具有放射性损伤、操作繁琐、检测时间长等缺点；ELISA具有灵敏度低、检测范围窄、检测时间长、重复性差等缺点。

技术领域

本发明属于免疫分析技术领域，具体涉及一种检测巨细胞病毒IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒及其制备方法。

背景技术

人巨细胞病毒(hCMV)属疱疹病毒科，是一种对人具有致病性的疱疹病毒。它广泛存在且具种族特异性，通过人群的密切接触传播。病毒衣壳为正20面体，由162个壳微粒组成，内含一个DNA核，一个或多个含脂质的外膜环绕在外壳周围。巨细胞病毒感染分为原发性感染和继发性感染。原发性感染可通过不同的传播途径和人不同的生理期获得(例如，分为先天性感染和后天感染)。原发性感染后，巨细胞病毒进入潜伏期，在此期间，B淋巴细胞中可发现病毒。当宿主的免疫调节功能发生变化，如怀孕、重大疾病、免疫抑制治疗，精神压力等，潜伏病毒的复制便被激活(继发性感染)。先天性感染由孕妇经胎盘传染给胎儿或出生时传染给胎儿。即使孕妇体内已存在抗hCMV抗体(被外源性病毒重新感染)，胎儿的感染也可能发生。如果血清反应阴性的妇女在怀孕期间接触了巨细胞病原，由此感染了巨细胞病毒，可引起流产、死产或新生儿畸形。怀孕期间感染hCMV病毒，生产正常婴儿的可能性为50％。先天性巨细胞病毒感染的临床表现通常非常严重，表现为痴呆，耳聋，视网膜脉络膜炎，头部畸形，脑积水，心脏病，肝炎，肝脾肿大，血小板减少等症状，死亡率很高。

大多数人(40％-90％)在童年或成人期间首次感染hCMV病毒，为后天性感染。后天性感染通过接触被感染的体液(如尿液、唾液、乳汁、精液、宫颈分泌物、粪便等)及被污染的血液制品传染，偶尔通过器官移植感染。后天性感染在免疫功能正常的感染者中，临床表现通常是比较缓和或无明显症状的。普遍表现为发烧、不舒服、血液中转氨酶水平增高且无黄疸。而有免疫类抑制的患者(器官移植病人，艾滋病患者，淋巴恶性增生患者或癌症病人)，hCMV感染会因为病毒扩散或侵入内脏产生严重的症状，包括：脾肿大，肺炎，溶血性贫血症、心肌炎和脑炎。hCMV感染对这类病人可能是致命的。被感染的患者数周后体内就可产成IgM抗体，随后一周内会产生IgG抗体。

特异性IgG的检测有助于区分是否感染hCMV病毒。这对疑似患者采取合适的预防措施尤其重要。检测hCMV的免疫系统状况具有重大意义：(a)可以预防免疫抑制病人感染后造成致命危害；(b)可以预防育龄期妇女或孕妇把病毒传染给胎儿；(c)可以预防器官移植造成的感染；(d)可以预防输血过程造成的感染。白细胞可携带hCMV，会通过血液或器官移植感染输血者或器官移植者。检测hCMV特异性IgM抗体有助于对患者进行充分的治疗。可以通过高低度的病毒特异性免疫球蛋白来预防hCMV感染。另外，有明显症状的病人应该用特异性抗病毒的药物进行治疗。

目前常用的检测巨细胞病毒IgG抗体的方法有放射免疫技术(RIA)、酶联免疫分析技术(ELISA)，但这两种方法存在诸多不足，如RIA存在放射性污染、标记物半衰期短、对操作者具有放射性损伤、操作繁琐、检测时间长等缺点；ELISA具有灵敏度低、检测范围窄、检测时间长、重复性差等缺点。

发明内容

本发明要解决现有技术中检测巨细胞病毒IgG抗体的方法的有效期短、操作繁琐、灵敏度低、检测成本高的技术问题，提供一种检测巨细胞病毒IgG抗体化学发光免疫分析测定试剂盒及其制备方法。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：