[发明专利]一株海洋弧菌及其分离方法与应用

说明书

本发明公开了一株海洋弧菌及其分离方法，进一步从华南沿海地区海水样本中分离获得一株产琼脂糖酶的海洋弧菌HN897，于2018年8月8日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，其保藏号为CGMCC NO.16232，菌种鉴定分析显示其为Vibrio astriarenae。在固体琼脂平板上培养该菌株显示其具有降解琼脂的能力，在2种培养液中(TSB和LB)所分泌的琼脂糖酶活性，表明该菌株具有高产琼脂糖酶的能力；由此，本发明的弧菌HN897在琼脂寡糖等生物医药领域具有广阔的应用和市场前景，同时为后续制备活力强、纯度高的酶制品奠定基础。

技术领域

本发明涉及一株海洋弧菌，具体涉及一株海洋弧菌及其分离方法与应用，属于生物医药技术领域。

背景技术

琼脂糖酶(Agarase)是1类糖苷水解酶，能够催化琼脂多糖分解为低聚糖。琼脂糖是1种线性大分子，由D-半乳糖和3，6-内醚-α-L-半乳糖通过α-1，3 和β-1，4糖苷键交替连接形成。

根据所催化糖苷键的不同，琼脂糖酶又可以分为α-琼脂糖酶(EC3.2.1.158) 和β-琼脂糖酶(EC3.2.1.81)2类；其中前者专一性作用于琼脂糖的α-1，3糖苷键，生成了琼脂寡糖，分别以β-D-半乳糖为非还原性末端和以3，6-内醚-α -L-半乳糖为还原性末端的琼脂寡糖(Agaro-oligosaccharides)，而后者则特异性作用于琼脂糖的β-1，4糖苷键，生成以β-D-半乳糖为还原性末端和以3，6-内醚 -α-L-半乳糖为非还原性末端的(Neoagaro-oligosaccharides)。

因此，琼脂糖酶可以帮助制备具有生物活性的琼脂寡糖，琼脂寡糖有着抗氧化、免疫调节、降血脂等作用，在医药领域有着广泛的应用前景。

琼脂糖酶分布比较广泛，在多种海洋物质中可以找到，如海洋软体动物、海藻、海洋微生物和海洋沉积物，但利用琼脂糖作为碳源的海洋微生物是琼脂糖酶生产的主要来源。

海洋微生物来源的琼脂糖酶不仅种类多，而且具有产量高、适应条件广等优点，是琼脂糖酶研究领域的热点。自1902年Gram从海水中分离鉴定出第1 株降解琼脂的芽孢杆菌以后，陆续已有20多个种属的细菌产琼脂糖酶，主要集中在弧菌(Vibrio spp.)、假单胞菌(Pseudomonas spp.)和假交替单胞菌 (Pseudoalteromonas spp.)等革兰氏阴性的海洋细菌中。

目前，琼脂酶的研究方法已经比较成熟，国外研究起步较早，已发现多种能产生琼脂酶的细菌及对应的琼脂酶，如AgaA，AgaB和AgaC等，研究重点也已从细菌提取琼脂酶转向对琼脂酶基因进行研究并通过将该基因重组在大肠杆菌中进行原核表达以获得更多更纯净的琼脂酶；国内研究比较晚，但是在国外研究的基础上，也取得了一些突破。

总结国内外当前的研究，存在以下问题尚待解决，一部分是α-琼脂酶的天然来源较少，因此对α-琼脂酶的研究比较少；另一部分是目前研究得出的高纯度琼脂酶相当昂贵，琼脂酶降解琼脂生成的副产物尚未能真正广泛用于工业生产。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种能够产琼脂糖酶的海洋弧菌及其分离方法。

为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案：

一种海洋弧菌，其保藏号为CGMCC NO.16232，于2018年8月8日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌种鉴定分析显示为Vibrio astriarenae。

上述的一种海洋菌株，应用于产琼脂糖酶。

上述的一种海洋菌株，其特征在于，应用于制备酶制品。

根据权利要求1所述的一种海洋菌株的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：