[发明专利]一株海洋弧菌及其分离方法与应用在审
申请号: | 201811091769.3 | 申请日: | 2018-09-19 |
公开(公告)号: | CN109161504A | 公开(公告)日: | 2019-01-08 |
发明(设计)人: | 赵哲;刘宇鹏;史燕;吴超;朱馨媛 | 申请(专利权)人: | 河海大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/02;C12N9/24;C12R1/63 |
代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人: | 严晓彪;董建林 |
地址: | 211106 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 海洋弧菌 琼脂糖酶 保藏 菌株 培养液 微生物菌种保藏 生物医药领域 应用和市场 固体琼脂 管理中心 菌种鉴定 琼脂寡糖 活力强 酶制品 弧菌 降解 琼脂 分泌 制备 样本 海水 高产 应用 分析 | ||
1.一株海洋弧菌,其特征在于,其保藏号为CGMCC NO.16232,于2018年8月8日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心,菌种鉴定分析显示为Vibrio astriarenae。
2.根据权利要求1所述的一株海洋菌株,其特征在于,应用于产琼脂糖酶。
3.根据权利要求2所述的一株海洋菌株,其特征在于,所述琼脂糖酶,应用于制备酶制品。
4.根据权利要求1所述的一株海洋菌株的分离方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、将待筛选菌株划线于TCBS培养基,恒温培养,进行复苏;挑取单菌落,接种于含NaCl的TSB培养基中,恒温震荡培养;
S2、取震荡培养后的菌液,点在含NaCl的TSA平板上,恒温正置培养后,筛选保存。
5.根据权利要求4所述的一株海洋菌株的分离方法,其特征在于,所述步骤S1中的待筛选菌株,来源于华南沿海地区海水样本。
6.根据权利要求4所述的一种海洋菌株的分离方法,其特征在于,所述TCBS培养基包括:5g/L酵母粉,10g/L蛋白胨,10g/L硫代硫酸钠,10g/L枸橼酸钠,5g/L牛胆粉,3g/L牛胆酸钠,20g/L蔗糖,10g/L氯化钠,1g/L柠檬酸铁,0.04g/L溴麝香草酚兰,0.04g/L麝香草酚兰,15g/L琼脂;
所述TSB培养基包括:磷酸氢二钠6g/L,磷酸二氢钾3g/L,氯化钠0.5g/L,氯化铵1g/L,维生素B1 2mg/L,硫酸镁1mM,氯化钙0.1mM和0.2%葡萄糖。
7.根据权利要求4所述的一株海洋菌株的分离方法,其特征在于,所述步骤S1中的恒温培养的温度为30℃,时间为24h;震荡培养的温度为30℃,转速为200r·min-1,NaCl的质量体积百分比为1.5%;
步骤S2中的菌液为5μL,NaCl的质量体积百分比为1.5%;正置培养的温度为30℃,时间为24~48h。
8.一株产琼脂糖酶的海洋弧菌的分离方法,其特征在于,基于权利要求4所述的海洋菌株的分离方法,所述正置培养后的平板用卢戈氏碘液染色,观测平板上菌落周围的凹陷情况以及染色后出现的透明圈,测量透明圈的大小以确定细菌具有的降解琼脂糖的能力,获得海洋弧菌HN897。
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