[发明专利]视网膜新生血管疾病模型的构建方法和应用

说明书

本发明公开了一种视网膜新生血管疾病模型的构建方法和应用，涉及生物技术领域。该构建方法通过敲除目标动物血管内皮细胞中的基因组中的Tmem30a基因序列，使目标动物表现出典型的视网膜新生血管疾病特征。该目标动物既可作为视网膜新生血管疾病模型，用于视网膜新生血管疾病的研究，可以帮助阐明视网膜新生血管疾病的的发病过程及机制，并为该疾病的治疗或预防提供新的靶标。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种视网膜新生血管疾病模型的构建方法和应用。

背景技术

视网膜新生血管(Retinal neovascularization,RNV)相关性眼部疾病严重危害人类视力健康，该类疾病主要包括早产儿视网膜病变(retinopathy of prematurity，ROP)、增殖性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy，PDR)、视网膜静脉阻塞(central retinal vein occlusion，RVO)等。病理性视网膜新生血管生成是这类疾病的主要病理特征。在全球范围内，视网膜新生血管性疾病发病率高、疾病后期治疗效果差、致盲率高。

目前，激光光凝及眼内注射抗血管内皮细胞生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)药物是临床上治疗RNV的主要手段。但大量研究表明，抗VEGF治疗并非对所有患者均有效，且抗VEGF治疗存在价格昂贵、需反复注射增加患者感染风险等诸多缺点，导致其临床运用受限。

因此，充分阐明RNV的发病机理，寻求其他有效治疗手段或者靶点，已经成为亟待解决的医学难题。

而目前，缺乏相关的可用于视网膜新生血管疾病研究的动物模型。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种视网膜新生血管疾病模型的构建方法，采用该构建方法可以得到视网膜新生血管疾病模型，该模型可表现出视网膜新生血管疾病特征，该模型可用于视网膜新生血管疾病的研究，可以帮助阐明RNV的发病过程及机制，并为该疾病的治疗或预防提供新的靶标。

本发明的另一目的在于提供由上述构建方法得到的视网膜新生血管疾病模型在视网膜新生血管疾病研究中的应用。利用该模型，可以帮助阐明RNV的发病过程及机制，并为该疾病的治疗或预防提供新的靶标。

本发明是这样实现的：

一方面，本发明提供了一种视网膜新生血管疾病模型的构建方法，其包括：敲除目标动物血管内皮细胞中的基因组中的Tmem30a基因序列。

Tmem30a基因是磷脂酰丝氨酸內翻酶的β亚基，它对于该类酶的稳定性及其功能至关重要。缺乏Tmem30a时，磷脂酰丝氨酸內翻酶不能正确折叠和定位，无法发挥其功能，进而导致生物膜磷脂的不对称性被破坏，导致一系列的病理特征。

本发明的发明人首次发现，在目标动物的血管内皮细胞中敲除Tmem30a基因即沉默Tmem30a基因的表达，可以使得目标动物表现出视网膜新生血管疾病相关的特征例如视网膜血管发育迟缓、血管密度降低、血管端细胞数目减少且表现出动脉瘤样的末端、端细胞触足数减少。因此，血管内皮细胞中的Tmem30a基因被敲除的动物可以作为视网膜新生血管疾病模型，用于视网膜新生血管疾病研究等领域中，为该疾病的研究例如发病过程、机制以及相关药物的筛选提供一种新的模型。

进一步地，在本发明的一些实施方案中，敲除Tmem30a基因序列是指敲除Tmem30a基因的外显子序列。

敲除Tmem30a基因序列可以是敲除Tmem30a基因全长序列，也可以是敲除Tmem30a基因部分序列例如部分外显子序列，无论敲除那种类型(部分或全长)的序列，只要是能够在血管内皮细胞中沉默Tmem30a基因的表达，使动物表现出视网膜新生血管疾病相应特征即落入本发明的保护范围。