[发明专利]一种DNA的提取方法及试剂盒

说明书

本发明提供了一种DNA提取的方法及试剂盒。本发明提供的方法包括使用滤纸吸附DNA。本方法旨在保证DNA质量的前提下，大大缩短提取时间、简化提取步骤和降低提取成本，为分子生物学研究提供了一种新的高效可行的技术途径。相对于其他现有提取DNA的方法，本发明方法操作简单、实用性强，对操作人员的技术要求比较低，未经专业培训的人员也可操作。本发明提供的试剂盒避免了传统方法中苯酚、氯仿、乙醇等有毒有机试剂的使用，环保高效；也无需使用离心机、硅基离心柱等其他试剂仪器，方便实施的同时显著降低了实施成本；对于动物、植物、微生物等多种样本中的DNA的提取，具有通用性，有效节约了资源。本发明破壁方法提高效率的同时，降低了成本。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种DNA的提取方法及试剂盒。

背景技术

目前，国内外研究中应用比较广泛的DNA提取方法有：SDS法、CTAB法、还有以硅胶基质为滤膜的离心柱吸附法等，大多是利用核酸的分子量差异和特异性膜与DNA结合达到分离、回收的目的。整个过程耗费时间长、价格昂贵。随着分子生物学技术的发展，找到一种简单、超快速获取真菌DNA的方法非常必要。

此外，真菌是一种真核生物，真菌DNA提取是真菌分子生物学研究的重要环节，由于真菌细胞含有甲壳素为主要成分的细胞壁，不同种属细胞壁的组成结构不同、细胞壁坚韧，增加了DNA提取难度。真菌DNA的提取方法很多，其主要步骤包括：真菌细胞壁的裂解、真菌细胞膜的破坏、DNA的释放及纯化。目前主要的破壁方法分为物理破壁法、化学破壁法和生物破壁法。其中最常用的为物理破壁法，根据所用破壁材料的不同可将物理破壁法分为普通研磨法、液氮研磨法、冻融法等。普通研磨法和冻融法都不好控制试验参数，液氮研磨容易冻伤皮肤，在研磨过程中真菌菌丝也容易损失，效率不高。

发明内容

本发明提供了一种DNA的提取方法及试剂盒，所述方法利用纤维素纸捕获提取样品中的DNA。本方法旨在保证DNA质量的前提下，大大缩短提取时间、简化提取步骤和降低提取成本，为分子生物学研究提供了一种新的高效可行的技术途径。

本发明的一个目的是提供一种DNA提取的方法，所示方法包括使用滤纸吸附DNA。

具体的，所述使用滤纸吸附DNA包括将滤纸浸泡入含有DNA的溶液中。

具体的，所述滤纸包括纤维素滤纸。

具体的，所述滤纸包括3MM层析滤纸。

具体的，所述任一滤纸包括一端连接有滤纸的装置。

具体的，所述任一滤纸包括一端连接有滤纸的卡纸或纸板。再具体的，所述卡纸包括介于纸和纸板之间的硬质厚纸；和/或再具体的，所述滤纸的长度为3cm,所述卡纸或纸板的长度为7cm,所述滤纸和所述卡纸或纸板的宽度均为0.7cm。

可选的，所述连接包括用双面胶粘贴。

具体的，所述任一方法还包括下述1)-8)所述中的至少一种：

1)采用MM400混合型研磨仪粉碎研磨样品；

2)粉碎研磨样品2-3min；

可选的，粉碎研磨样品2min；

3)在每100mg的样品中加入500-1000μl裂解液；

可选的，在每100mg的样品中加入700μl裂解液；

4)将样品进行裂解，裂解时间包括3-5min；

可选的，裂解时间为5min；