[发明专利]抗GPC3全人源化抗体、其嵌合抗原受体细胞及应用

说明书

本发明涉及抗GPC3全人源化抗体、其嵌合抗原受体细胞及应用。该抗体至少具有重链CDR1、重链CDR2、重链CDR3、轻链CDR1、轻链CDR2、轻链CDR3之一。该抗体可用于制备细胞或偶联物、诊断试剂盒、药物或药物组合物；该核酸用于制备抗GPC3全人源化抗体、药物或药物组合物；该细胞或偶联物用于制备药物或药物组合物；该药物或药物组合物具有针对GPC3阳性肿瘤的抗肿瘤作用。本发明通过噬菌体展示技术筛选出抗GPC3的全人源化抗体，该抗体特异性强，亲和力高；采用该抗体的细胞如嵌合抗原受体T细胞对GPC3阳性的肿瘤具有有效地杀伤作用。

技术领域

本发明涉及一种抗GPC3全人源化抗体、其嵌合抗原受体细胞及应用，属于生物技术领域。

背景技术

据发明人所知，肝细胞癌发病广，致死率高，缺乏有效的治疗手段。病人晚期存活率仅有3％^[1]。多数病人确诊时已经处于癌变晚期，对化疗药物不敏感，手术切除后复发率高^[2,3]。glypican-3(GPC3)是一种硫酸乙酰肝素蛋白聚糖，通过GPI锚定在细胞膜表面。GPC3在胚胎发育早期表达，通过调控发育过程中的关键信号通路(如Wnt信号)参与调控细胞增殖。在个体发育成熟后，GPC3表达关闭。大量的研究发现，GPC3在肝细胞癌中特异性高表达，是目前较受关注的肝细胞癌诊断标志物和治疗靶点^[4,5]。

由于肝脏的器官功能特殊性，小分子化学药物极易被肝脏代谢清除。相比较而言，生物大分子药物如治疗型抗体在肝癌的治疗中具有高活性、特异性好等优势。由于GPC3是细胞膜表面蛋白，靶向GPC3的抗体除应用于裸抗治疗外，抗体衍生物以及衍生的嵌合抗原受体T细胞均可作为治疗肝细胞癌的可行性手段，具有直接的临床转化潜力。

经检索发现，专利号CN201280029201.3，授权公告号CN103596985B的中国发明专利，公开了一种对磷脂酰肌醇蛋白聚糖3特异的人单克隆抗体及其用途。以该技术方案为代表的现有技术中已经存在了一些抗GPC3抗体。发明人课题组经系统地试验研究后得出了不同于现有技术的抗GPC3全人源化抗体。

发明内容

本发明的主要目的是：针对现有技术存在的问题，提供一种抗GPC3全人源化抗体、以及具有该抗体的嵌合抗原受体细胞，有抗肿瘤应用前景。

本发明解决其技术问题的技术方案如下：

一种抗GPC3全人源化抗体，所述抗体包括重链和轻链；其特征是，所述抗体至少具有以下技术特征之一：

i、所述重链包括重链CDR1，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸残基26-33；

ii、所述重链包括重链CDR2，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸残基50-59；

iii、所述重链包括重链CDR3，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸残基98-102；

iv、所述轻链包括轻链CDR1，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸残基161-165；

v、所述轻链包括轻链CDR2，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸残基182-185；

vi、所述轻链包括轻链CDR3，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸残基223-228。

优选地，所述抗体至少具有以下技术特征之一：

i、所述重链包括重链CDR1，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸残基26-33；所述重链包括重链CDR2，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸残基50-59；所述重链还包括重链CDR3，即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列中的氨基酸残基98-102；