[发明专利]实验动物视网膜色素变性试验模型的制备方法

说明书

本发明公开一种实验动物视网膜色素变性试验模型的制备方法，是将碘酸钠溶液通过玻璃体腔注射给予实验动物，碘酸钠的给药剂量为0.4～1.2mg/眼。本发明的方法具有以下优点：1)碘酸钠用量小，直接作用于视网膜局部，无全身暴露，避免了实验动物因暴露量太大导致的动物全身的损害或动物死亡；2)不需要外科手术操作，降低实验操作难度，减少对动物的手术损伤；3)可以根据实际需要选择单侧或双侧造模。

技术领域

本发明属于医药研究的非临床研究领域，特别是涉及医药实验室科研活动中一种视网膜色素变性试验模型的制备方法，以及治疗手段的临床前评价及相关研究。

背景技术

视网膜色素变性是一种遗传性、营养不良性退行性眼底病变现象，主要表现为慢性进行性视野缺失、夜盲、色素性视网膜病变和视网膜电图异常等。视网膜色素上皮细胞的功能障碍或丧失被认为是该疾病的发展过程中的关键因素。因此，设计一种理想的动物试验模型，对视网膜色素变性的相关机制研究和教学演示具有重大意义。

碘酸钠是一种强氧化剂，作用在视网膜局部可引起蛋白质变性，阻断视网膜色素上皮糖代谢相关酶的活性，从而减弱视网膜色素上皮细胞和感光细胞间的粘附，最终引起视网膜色素上皮细胞和感光细胞的功能丧失。现有的在兔模型制备方式中，以耳缘静脉注射碘酸钠的造模方式为主。王凯等(2008)以40mg/kg的剂量耳缘静脉注射给予青紫兰兔造模，王立春等(2015)分别以15、25、35mg/kg的剂量耳缘静脉注射给予青紫兰兔造模。通过该方式给予碘酸钠，视网膜局部的暴露量相对较低，往往会由于较大的系统暴露量引起动物全身的损害，甚至动物死亡，且由于动物个体代谢差异，到达视网膜局部的药量，也很难达到一致，对后续的动物实验带来不利影响。计江东等(2014)通过颈动脉注射给药方式在非人灵长类动物进行造模，姜来生等(2017)通过颈动脉注射给药方式在青紫蓝兔进行造模。上述给药方式避免了较大的系统暴露量，但该给药方式需要对动物进行手术，分离出颈动脉，对动物局部的损伤大，操作难度高。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于，提供一种实验动物视网膜色素变性试验模型的制备方法，一方面能够避免外科手术，减少对实验动物带来的手术损伤，降低实验操作难度；另一方面能够降低动物的全身暴露量，避免实验动物死亡，提高实验动物福利。

为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案为：一种实验动物视网膜色素变性试验模型的制备方法，是将碘酸钠溶液通过玻璃体腔注射给予实验动物，碘酸钠的给药剂量为0.4～1.2mg/眼。

具体的，所述实验动物为动物实验用兔；优选为新西兰大白兔。

优选为，给药剂量为0.6～0.8mg/眼；更优选为，给药剂量为0.8mg/眼。

具体的，碘酸钠的浓度为6～30mg/mL，碘酸钠溶液的注射体积为40～60μL/眼。

优选为，碘酸钠的浓度为8～24mg/mL，碘酸钠溶液的注射体积为50μL/眼。

具体的，给药后，连续3天使用抗生素对动物眼球进行护理。

具体的，造模后4、14、21和28天分别对动物进行眼科检查随访，包括视网膜电图(ERG)、眼底照相(FP)、光学相干断层扫描(OCT)。

本发明的方法具有以下技术优势：1)碘酸钠用量小，直接作用于视网膜局部，无全身暴露，避免了实验动物因暴露量太大导致的动物全身的损害或动物死亡；2)不需要外科手术操作，降低实验操作难度，减少对动物的手术损伤；3)可以根据实际需要选择单侧或双侧造模。

附图说明

图1为兔造模后4天、14天、21天、28天视网膜电图(ERG)，其中，a为造模剂量0.2mg/眼；b为造模剂量0.8mg/眼。

图2为兔0.8mg/眼碘酸钠造模后4天、14天、21天、28天光学相干断层扫描(OCT)结果图。