[发明专利]一种橡胶塞载体中蓟马聚集信息素释放速率的测定方法

说明书

本发明属于农业虫害防治生理指标测定技术领域，具体涉及一种蓟马聚集信息素(R)‑lavandulyl acetate释放速率的测定方法。该方法将固相微萃取技术和气相色谱‑质谱联用技术相结合，通过测定载体中(R)‑lavandulyl acetate的释放量进行释放速率的测定，其中载体为橡胶塞载体，固相微萃取的萃取时间为30min，萃取剂量为1000ng、10000ng或100000ng。固相微萃取所使用的萃取头为100μm的Polydimethylsiloxane Coating萃取头。本发明所述的方法能够实现蓟马信息素(R)‑lavandulyl acetate在载体中释放速率的快速、准确测定，该方法为明确信息素组分在载体上的释放模式提供了可行方法。

技术领域

本发明属于农业虫害防治生理指标测定技术领域，具体涉及一种橡胶塞载体中蓟马聚集信息素释放速率的测定方法。

背景技术

蓟马是农作物上常见的重要害虫，其通过直接取食作物和间接传播病毒给作物造成了巨大的经济损失。目前在全球分布比较广且给农作物造成巨大危害的蓟马种类主要有花蓟马属的花蓟马(Frankliniella intonsa)和西花蓟马(F.occidentalis)以及蓟马属的棕榈蓟马(Thrips palmi)等。由于蓟马具有个体微小、隐秘性强、繁殖力强、极易产生抗药性等特点，化学防治防控效果不是非常理想。再加上农药的大量使用在控制虫害的同时，也带来了农药残留超标、环境污染、害虫抗药性与再猖獗等一系列问题，发展绿色防控技术迫在眉睫。

昆虫信息素是一种非化学控制措施，不仅可以进行害虫种群监测和防治，同时也可以和其他防治措施相结合以提高虫害防治效果。聚集信息素是信息素的一种，由雌虫和雄虫或者任一性别的昆虫产生，能够引起雌、雄两性同种昆虫聚集。已有三种主要蓟马害虫的聚集信息素被分离鉴定。花蓟马属的西花蓟马和花蓟马的聚集信息素主要活性成分相同，为neryl-(S)-2-methylbutanoate(苨肉基(S)-2-甲基丁酸酯)和(R)-lavandulylacetate((R)-薰衣草乙酸酯)。蓟马属的棕榈蓟马的聚集信息素活性组分为(R)-lavandulyl 3-methyl-3-butenoate((R)-3-甲基-3-丁烯酸薰衣草酯)。

由于昆虫信息素的组分多具有挥发性，在自然条件下易挥发和降解，需要借助缓释载体来保护信息素免受环境降解，保持信息素的稳定均匀释放。信息素在载体中的持效期与其释放速率密切相关。当前，没有公开对蓟马聚集信息素在不同缓释载体的释放速率进行测定的稳定方法。固相微萃取法(solid phase microextraction,SPME)是一种新型样品前处理方法,该技术集取样、萃取、浓缩于一体，不需要有机溶剂，具有快速高效、成本低、安全性高，能够与其他仪器联用等众多优点，在昆虫信息素研究中得到了广泛应用。固相微萃取法的成功应用与萃取时条件的选取密切相关。影响固相微萃取的因素包括样品量多少、PH值、萃取时间、萃取温度、萃取涂层种类等，对于人工合成聚集信息素组分在诱芯载体中聚集信息素组分的萃取条件尚未明确，操作简单、快速、灵敏度高的测定方法对于研究信息素在载体中的释放规律至关重要。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种载体中蓟马聚集信息素释放速率的测定方法，可以快速、准确地测定不同载体中信息素的释放量。本发明采用固相微萃取技术和气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术研究蓟马三种信息素在橡胶塞和PVC管两种载体中的释放速率，通过对比不同萃取时间和不同剂量下的释放速率，筛选适宜于不同信息素的最佳萃取条件。

本发明小组惊奇地发现在温度25±1℃、相对湿度60％±5％条件下，使用固相微萃取进行载体中释放速率测定时针对不同的信息素，不同的载体具有不同的适应性，固相微萃取并不适宜于任何剂量的任何信息素在任意一种载体中释放速率的测定。