[发明专利]一种用于自身免疫病标志物检测的蛋白芯片及其制备方法在审
申请号: | 201810950962.1 | 申请日: | 2018-08-21 |
公开(公告)号: | CN108828234A | 公开(公告)日: | 2018-11-16 |
发明(设计)人: | 施启尧;丁俊杰;孙裔雷;泮锋纲 | 申请(专利权)人: | 江苏三联生物工程有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
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地址: | 214038 江苏省无锡市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 抗体 蛋白芯片 自身免疫病 标志物检测 制备 检测 蛋白芯片技术 预处理 抗dsDNA抗体 诊断试剂盒 抗Sm抗体 抗原溶液 联合检测 标志物 低成本 有效地 玻片 点样 封闭 应用 开发 | ||
1.一种用于自身免疫病标志物检测的蛋白芯片,其特征在于所述蛋白芯片的制备方法包括如下步骤:
(1)黑玻片预处理;
(2)抗原溶液点样;
(3)封闭工艺,制得所述蛋白芯片。
2.根据权利要求1所述的蛋白芯片,其特征在于步骤(1)中所述黑玻片预处理的方法为:
①将黑玻片置于含有NaOH的玻片预处理液中浸泡16~24h,之后采用纯化水清洗2~8次;
②将黑玻片置于质量浓度为0.05~1%的硅烷溶液中浸泡20~60min;
③将浸泡好的黑玻片氮气吹扫后放入烘箱中,于100~180℃条件下烘烤0.2~0.6h。
3.根据权利要求1所述的蛋白芯片,其特征在于步骤(2)中所述抗原溶液包括SSA52抗原、SSA60抗原、SSB抗原、dsDNA抗原、U1-snRNP抗原、CENP-B抗原、Histone抗原、P0抗原、Sm抗原、Nucleosome抗原、Scl-70抗原和Jo-1抗原溶液。
4.根据权利要求1所述的蛋白芯片,其特征在于步骤(2)中所述点样的方法为机器自动化点样。
5.根据权利要求1所述的蛋白芯片,其特征在于步骤(3)中所述封闭过程为:将点样好的黑玻片没入封闭液中1~24h,之后取出黑玻片,并离心去除残余封闭液,制得所述蛋白芯片。
6.根据权利要求5所述的蛋白芯片,其特征在于所述封闭液为含有封闭蛋白的缓冲溶液;所述封闭蛋白为牛血清白蛋白或卵清蛋白;所述缓冲液为PBS缓冲液、Tris缓冲液、HEPS缓冲液、MOPS缓冲液中的一种或多种。
7.一种权利要求1~6任一项所述蛋白芯片的应用,其特征在于将所述蛋白芯片制成试剂盒。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于所述试剂盒还包括标记有HRP酶或碱磷酶的第二抗体溶液、对标记物敏感的化学发光底物。
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