[发明专利]一种靶向肿瘤VEGFR-3分子的近红外荧光显像剂的设计、合成及应用

说明书

本发明涉及一种靶向肿瘤VEGFR‑3分子的近红外荧光显像剂的设计、合成和应用，其结构式为ICG‑OSu‑(PEG)n‑G(CGLARGRGC)，其中ICG为近红外荧光显像剂吲哚菁绿，ICG‑OSu为磺酸基吲哚菁绿活化脂，环状多肽G(CGLARGRGC)的核心LARGR为靶向VEGFR‑3分子的多肽TMVP1，为羧基反应性，两者通过聚乙二醇(PEG)桥接，其中n为2到20的整数。本发明提供的近红外分子显像剂，极大地提高了ICG显像宫颈癌、乳腺癌病灶及其淋巴结转移灶的特异性，对以后临床上诊断宫颈癌、乳腺癌以及应用荧光腔镜清除肿瘤转移淋巴结提供了良好指示。

技术领域

本发明涉及医学影像学显像技术领域，特别是在荧光腔镜下恶性肿瘤的精准切除手术。

背景技术

近年来，恶性肿瘤已成为威胁人类健康的首要疾病，2014年《世界癌症报告》中国新诊断癌症病例为307万，占全球总数的21.8％。癌症死亡人数约220万，占全球癌症死亡人数的26.9％。目前实体肿瘤患者治疗方式仍以手术切除为主，辅以化疗、放疗和分子靶向治疗，而影响癌症患者治疗效果和预后最为关键的是早发现、早诊断和早干预。现有的CT/MR/B超等影像学检查已经很好的应用于肿瘤的诊断，但其诊断的准确度取决于医生是否具有丰富的经验和扎实的理论知识，并且其鉴别诊断良恶性肿瘤仍然存在着不足之处。因此，寻找到一种特异的诊断方法或诊断剂依然是每一位科研工作者不懈追求的目标。

肿瘤新生淋巴管的形成是促进肿瘤细胞播散和淋巴结转移关键的环节，特别是转移方式以淋巴结转移为主的宫颈癌、乳腺癌和胃癌等。临床上乳腺癌和宫颈癌等肿瘤患者常规的要进行淋巴结清扫，以提高患者的生存率、决定患者术后的化疗的疗程与方案和评估患者的预后。大量的研究证明在肿瘤细胞转移到淋巴结前，淋巴结微环境已经发生改变促进肿瘤细胞的迁移(种子土壤学说)，其中淋巴结内微环境VEGFC大量增加促进大量新生淋巴管的形成。基于新生淋巴管在肿瘤转移及播散的重要性，科学家们希望研发出一种针对肿瘤新生淋巴管的显像剂。VEGFR-3蛋白是一种酪氨酸激酶受体(FLT4)，其配体为VEGF-C和VEGF-D，在胚胎的早期发育VEGFR-3在所有的内皮细胞均表达，但是随着胚胎的成熟，其表达仅局限在淋巴管内皮细胞。近年来多项研究证实VEGFR-3在新生淋巴管的生成和维持中起到重要的作用，并与肿瘤的增殖及侵袭转移直接相关，可作为淋巴管转移标志物之一，肿瘤转移的前哨淋巴结和微量肿瘤转移淋巴结高度表达均表明VEGFR-3可作为肿瘤诊断治疗的靶向分子。

公开号为CN103804470A的申请中，利用鞭毛噬菌体肽库筛选出了对VEGFR-3具有亲和性的含有五个氨基酸的肽段LARGR(命名为TMVP1)。通过前期的实验表明，这个五个氨基酸的肽段对淋巴管具有高亲和性，有作为分子靶向诊断剂的潜质，但是对于具体如何应用到肿瘤诊断中并未涉及，该五个氨基酸的肽段LARGR在荧光显像中的应用的效果如何也是未知。

吲哚菁绿(Indocyanine Green，ICG)，是一种高灵敏近红外荧光素，其已经被美国FDA批准用于临床。其安全性较高，且已有基于ICG开发的荧光腹腔镜应用于临床。ICG静脉注射至人体后，98％-99％的ICG与血浆高分子蛋白(如白蛋白)结合，ICG-蛋白质复合物的激发波长为750-810nm，在近红外区，此区间生物组织的透射性达到最大。欧美国家主要将其用于眼部血管造影、心输出量测定、肝功能评估，近年来有大量关于ICG在肿瘤的诊断、治疗方面的研究。在荧光腹腔镜下将ICG用于宫颈癌、子宫内膜癌的前哨淋巴结显像，增加了前哨淋巴结活检的阳性率。因此ICG是一个很好的前哨淋巴结指示剂，但是其对淋巴结的显像存在明显的局限性，缺乏特异性，无法区分肿瘤转移的淋巴结与炎性增生的淋巴结。