[发明专利]合成低聚异麦芽糖的解脂亚罗威酵母菌株及其合成方法

权利要求书

1.一种代谢工程改良的解脂亚罗威酵母(Yarrowia lipolytica)菌株，其特征在于，该菌株含有如下异源基因表达盒：

(1)α-淀粉酶基因表达盒；

(2)产麦芽糖淀粉酶基因表达盒；

(3)α-葡萄糖苷酶基因表达盒；

所述菌株能合成低聚异麦芽糖。

2.如权利要求1所述的解脂亚罗威酵母菌株，其特征在于，所述菌株还含有β-淀粉酶基因表达盒、新普鲁兰酶基因表达盒、葡萄糖转苷酶基因表达盒中的至少一种。

3.如权利要求1所述的解脂亚罗威酵母菌株，其特征在于，所述菌株以用于蛋白表达宿主的解脂亚罗威酵母菌株为出发菌株。

4.如权利要求3所述的解脂亚罗威酵母菌株，其特征在于，所述菌株以解脂亚罗威酵母BLC13 CGMCC NO.7326为出发菌株。

5.如权利要求4所述的解脂亚罗威酵母菌株，其特征在于，所述菌株为解脂亚罗威酵母CGMCC NO.14785。

6.一种如权利要求1～5中任一项所述的解脂亚罗威酵母菌株在合成低聚异麦芽糖中的用途。

7.一种用如权利要求1～5中任一项所述的解脂亚罗威酵母菌株合成低聚异麦芽糖的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

S1、将所述解脂亚罗威酵母菌株在含碳源、氮源以及无机盐的培养基中进行发酵培养，培养结束后分离得到游离细胞与上清液；

S2、用游离细胞作为酶催化淀粉、糊精、麦芽糖中的一种或几种的组合生成低聚异麦芽糖；

或者，将游离细胞进行固定化，得到固定化细胞；用固定化细胞作为酶催化淀粉、糊精、麦芽糖中的一种或几种的组合生成低聚异麦芽糖。

8.如权利要求7所述的解脂亚罗威酵母菌株合成低聚异麦芽糖的方法，其特征在于，步骤S1中，所述培养基中，碳源为葡萄糖或甘油的一种或两种，碳源用量为10～400克/升；氮源为蛋白胨、酵母粉、酵母浸膏、玉米浆干粉、玉米浆、磷酸氢二铵、柠檬酸铵、尿素中的一种或几种的混合，氮源的用量为5～25克/升；无机盐为镁、锰、铜、锌离子中的一种或几种，无机盐用量为0～3克/升。

9.如权利要求7所述的解脂亚罗威酵母菌株合成低聚异麦芽糖的方法，其特征在于，步骤S1中，所述解脂亚罗威酵母菌株为解脂亚罗威酵母CGMCC NO.14785；所述上清液为含有赤藓糖醇溶液，用于分离纯化赤藓糖醇。

10.如权利要求7所述的解脂亚罗威酵母菌株合成低聚异麦芽糖的方法，其特征在于，步骤S2中，游离细胞作为酶催化具体为：在游离细胞中加入含淀粉、糊精、麦芽糖中的一种或几种组合的水溶液，在30～80℃，pH3.0～8.0条件下振荡或搅拌，进行转化得到含低聚异麦芽糖的溶液；固定化细胞作为酶催化具体为在固定化细胞或固定化细胞柱中加入含淀粉、糊精、麦芽糖中的一种或几种组合的水溶液，在30～80℃，pH3.0～8.0条件下振荡或搅拌，进行转化得到含低聚异麦芽糖的溶液。