[发明专利]一种采用脐血干细胞输注联合自体外周血干细胞延缓卵巢早衰和治疗骨质疏松的方法

权利要求书

1.一种采用脐血干细胞输注联合自体外周血干细胞延缓卵巢早衰和治疗骨质疏松的方法，其特征在于：包含有以下步骤：

第一步，制备脐血细胞因子，制备脐血干细胞；

第二步，激发自体外周血干细胞；

第三步，将脐血细胞因子输注血液，使脐血细胞因子与自体外周血干细胞相联合进行治疗；

第四步，定期随访治疗者的各项指标变化。

2.根据权利要求1所述的一种采用脐血干细胞输注联合自体外周血干细胞延缓卵巢早衰和治疗骨质疏松的方法，其特征在于：

所述脐血细胞因子是包含有GDF11和XZZY-5的脐血血浆，脐血细胞因子具体提取过程为：分离脐血血浆，经检测脐血血浆中含有脐血细胞因子GDF11和XZZY-5；脐血经高速分离机离心使血细胞与血浆分层，提取血浆，将血浆与配置FBS保护剂1：1在4℃混合，使DMSO终浓度为10％，采用1℃/min程序降温将至-40℃，再以5℃/min的速率程序降温快速将至-80～-100℃，然后投入液氮中保存备用。

3.根据权利要求1所述的一种采用脐血干细胞输注联合自体外周血干细胞延缓卵巢早衰和治疗骨质疏松的方法，其特征在于：

所述脐血干细胞是将脐血在无菌条件下采集单个核细胞，与配置FBS保护剂1：1在4℃混合，使DMSO终浓度为10％，采用1℃/min程序降温将至-40℃，再以5℃/min的速率程序降温快速将至-100℃，然后投入超低温液氮中保存备用。

4.根据权利要求1所述的一种采用脐血干细胞输注联合自体外周血干细胞延缓卵巢早衰和治疗骨质疏松的方法，其特征在于：

在所述第二步中，激发自体干细胞的过程为：

a.对脐血干细胞进行37℃恒温水浴复苏，洗涤DMSO，使得DMSO浓度在1％以下；

b.对治疗者静脉滴注脐血干细胞一个单位，观察2-3天后，皮下注射粒细胞集落刺激因子，以下简称G-CSF，用量为7μg/kg，2次/日，两次用药时间需间隔十小时以上，5-7天为一疗程；

c.治疗者用药后每天观察体温和全身症状；第3天开始每天上午用药后2h，采血查血常规，观察各项指标变化；第4天开始血液涂片显微镜下观察有无干细胞，如有干细胞观察其数量及形态；一般5-7天左右干细胞数量达到峰值；

d.促使干细胞归巢：当血液中干细胞达到峰值后，进行第二次脐血干细胞静脉滴注，促使多余的干细胞归巢。

5.根据权利要求1所述的一种采用脐血干细胞输注联合自体外周血干细胞延缓卵巢早衰和治疗骨质疏松的方法，其特征在于：

在所述第三步中，对脐血细胞因子进行37℃恒温水浴复苏，热源检测和内毒素检测后输注入治疗者血液。

6.根据权利要求5所述的一种采用脐血干细胞输注联合自体外周血干细胞延缓卵巢早衰和治疗骨质疏松的方法，其特征在于：

所述脐血细胞因子复苏，将脐血细胞因子37℃恒温水浴，洗涤DMSO，使得DMSO浓度在1％以下。再离心洗涤，取少许上层上清加入到鲎试剂中进行热源检测和内毒素监测。最后，回输的血型配对与静脉回输，取回输者少许血液样本与脐血细胞因子进行血液血型配对检测，检测合格后进行静脉回输。

7.根据权利要求1所述的一种采用脐血干细胞输注联合自体外周血干细胞延缓卵巢早衰和治疗骨质疏松的方法，其特征在于：整个治疗疗程中，分别在治疗者治疗一个月、三个月、五个月、七个月后进行复查，通过体能测试结果、骨密度测试、结果退行性关节炎以及绝经后卵巢大小变化。