[发明专利]一种分离替诺福韦艾拉酚胺及其对映异构体的检测方法

说明书

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种分离替诺福韦艾拉酚胺及其对映异构体的检测方法。所述方法包括：照高效液相色谱法测定，用多糖衍生物手性色谱柱，以正己烷‑异丙醇为流动相，加入碱性试剂调节峰形，在一定条件下进行等度洗脱。本发明可以有效地分离替诺福韦艾拉酚胺及其对映异构体，能够更准确地检测对映异构体的含量。本方法采用正相方法，等度洗脱，简单易操作，且峰形较好，分离度合格；方法学验证显示本方法专属性强，灵敏度高，准确度、耐用性均良好。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种检测替诺福韦艾拉酚胺对映异构体的高效液相色谱法。

背景技术

替诺福韦艾拉酚胺：化学名称为（（（S）-（（（（R）-1-（6-氨基-9H-嘌呤-9-基）丙-2-基）氧基）甲基）（苯氧基）磷酰基）氨基）-（S）-丙酸异丙酯，分子式为C₂₁H₂₉O₅N₆P，分子量为476.47，其化学结构式为：

对映异构体：化学名称为（（R） - （（（S）-1-（6-氨基-9H-嘌呤-9-基）丙-2-基）氧基）甲基）（苯氧基）磷酰基）氨基）-(R)-丙酸异丙酯，分子式为C₂₁H₂₉O₅N₆P，分子量为476.47，其化学结构式为：

乙肝是一种发病率高、感染力强、严重危害人类健康的流行性传染病，我国是高发区。根据2002年全国乙肝病毒（HBV）感染者血清流行病学调查，HBsAg的流行率为9.09％，即约有1.2亿人携带HBV，其中慢性乙肝患者约3000多万。我国每年有30万以上人死于乙肝相关性并发症，其中慢性乙肝、代偿期和失代偿期肝硬化的5年病死率分别为0％-2％、14％-20％和70％-86％。

替诺福韦艾拉酚胺由吉利德科学（Gilead Sciences）研制。该药是替诺福韦（tenofovir）的一种试验性新颖前体药物，主要用于治疗艾滋病（HIV）感染和乙肝病毒感染。于2017年01月09日批准在欧盟上市，2016年11月10日批准在美国上市，2016年12月19日批准在欧盟上市商品名Vemlidy®。在临床上，该药给药剂量更小，安全性更高。

据文献报道，替诺福韦艾拉酚胺对映异构体的疗效不如替诺福韦艾拉酚胺，因此，考虑到用药的安全性和有效性，需要严格控制替诺福韦艾拉酚胺中对映异构体的含量。

目前替诺福韦艾拉酚胺原料和相关的制剂无药典等法定标准。因此，有必要开发一种检测替诺福韦艾拉酚胺中对映异构体的方法，该方法必须能够有效分离替诺福韦艾拉酚胺及其对映异构体。有鉴于此，本发明提供了一种方法，能够满足该要求，该方法能够有效分离替诺福韦艾拉酚胺及其对映异构体，保证检测的有效性，能够准确严格地控制替诺福韦艾拉酚胺的质量。

发明内容

本发明为解决该问题提供了一种检测替诺福韦艾拉酚胺中对映异构体的HPLC方法，该方法能够有效分离替诺福韦艾拉酚胺及其对映异构体，保证检测的有效性，能够准确严格地控制替诺福韦艾拉酚胺的质量，该方法专属性强，灵敏度高，准确度与耐用性良好。

本发明提供了一种有效分离替诺福韦艾拉酚胺及其对映异构体的高效液相色谱分析方法。所述方法包括：照高效液相色谱法测定，用多糖衍生物手性色谱柱，以正己烷-异丙醇为流动相，加入碱性试剂调节峰形，在一定条件下进行等度洗脱。包括以下步骤：

在高效液相色谱仪上进行检测

色谱柱填充剂：多糖衍生物

柱温：25℃-35℃

流速：0.8 mL/min-1.2 mL/min

检测波长：258nm-262nm