[发明专利]一种氢溴酸加兰他敏中间体及杂质的检测方法

说明书

本发明涉及一种氢溴酸加兰他敏中间体及杂质的检测方法，步骤为：将待测加兰他敏中间体用稀释剂配制成样品溶液，以十八烷基键合硅胶为固定相，采用无机盐缓冲溶液为流动相A，有机溶剂为流动相B，进行梯度洗脱，在加兰他敏中间体吸收波长下，记录色谱图。本发明以十八烷基键合硅胶为固定相，无机盐缓冲溶液为流动相A，有机溶剂为流动相B进行梯度洗脱，在加兰他敏中间体吸收波长，合适的柱温下记录色谱图，能够完全分离加兰他敏中间体I和各主要杂质，峰型对称，使主物质和各杂质在色谱图上仅显示1个色谱峰，从而实现了各杂质准确定量检测。

技术领域

本发明涉及一种氢溴酸加兰他敏中间体及杂质的检测方法。

背景技术

氢溴酸加兰他敏是乙酰胆碱酯酶活性的可逆性抑制药，作用与新斯的明相似。它还对烟碱性受体有内在活性，主要用于阿尔茨海默症轻度至中重度痴呆的对症治疗。

氢溴酸加兰他敏化学名：(4aS,6R,8aS)-3-甲氧基-11-甲基-5,6,9,10,11,12-六氢-4aH-苯并[2,3]苯并呋喃并[4,3-cd]氮杂-6-羟基氢溴酸盐；CAS号为：1953-04-4；分子式为C₁₇H₂₁NO₃·HBr；结构式如下：

氢溴酸加兰他敏中间体化学名：1-溴-3-甲氧基-氧代-5,6,9,10-四氢-4aH-苯并[2,3]苯并呋喃并[4,3-cd]氮杂-11(12H)-甲酰胺；CAS号为122584-14-9；分子式为C₁₇H₁₆BrNO₄；结构式如下：

在合成化合物I的过程中，前一步中间体(化合物III)有可能反应不完全，或者生成副产物(化合物IV)，该过程中包含有2个杂质，结构式见表1，需要进行严格控制。

表1.加兰他敏中间体I合成过程中产生的杂质

作为氢溴酸加兰他敏的关键中间体I，必须对合成路线中引入的有关杂质进行严格控制。因此，实现对氢溴酸加兰他敏的关键中间体I所有潜在杂质的分离，对控制加兰他敏中间体I和原料药氢溴酸加兰他敏的质量控制中具有非常重要的意义。

现有技术中未发现有文献报道加兰他敏中间体I的有关物质测试方法。由于加兰他敏中间体I化学结构式中含有甲酰胺基团，内酰胺键围绕单键旋转受阻，具有较高的旋转能垒，因此可以分离出两个阻转异构体。这一性质导致在其它常规杂质的检测方法中，加兰他敏中间体I和化合物III在反相色谱中出2个色谱峰，化合物IV出3个色谱峰，且各峰的百分含量不断发生转变，无法准确积分和定量；且无法验证上述方法的定量限和检测限。

因此，提供一种专用于检测氢溴酸加兰他敏中间体及杂质的方法，尤为必要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的现状，提供一种能使主物质和各杂质在色谱图上仅显示1个色谱峰，从而实现了各杂质准确定量检测的氢溴酸加兰他敏中间体及杂质的检测方法。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种氢溴酸加兰他敏中间体及杂质的检测方法，其特征在于：包括以下步骤

将待测加兰他敏中间体用稀释剂配制成样品溶液，以十八烷基键合硅胶为固定相，采用无机盐缓冲溶液为流动相A，有机溶剂为流动相B，进行梯度洗脱，在加兰他敏中间体吸收波长下，记录色谱图；

其中，所述无机盐缓冲溶液的pH值为2.0～3.5；所述的柱温为65℃～75℃。

在上述方案中，所述十八烷基键合硅胶为Waters Xbridge C18。优选地，WatersXbridge C18的规格为4.6×150mm,3.5μm。