[发明专利]瞬时过表达编码药物转运蛋白和/或药物代谢酶的基因的可消耗的低温保存的细胞有效
| 申请号: | 201810895949.0 | 申请日: | 2013-09-11 |
| 公开(公告)号: | CN108949694B | 公开(公告)日: | 2022-06-17 |
| 发明(设计)人: | 李娜;王洁;C·J·帕特恩 | 申请(专利权)人: | 康宁有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;A01N1/02 |
| 代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 余颖 |
| 地址: | 美国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 瞬时 表达 编码 药物 转运 蛋白 代谢 基因 消耗 低温 保存 细胞 | ||
1.包含一种或多种瞬时过表达基因的低温保存的重组细胞,所述基因编码药物转运蛋白,其中所述药物转运蛋白的活性在从低温保存中解冻后的所述低温保存的重组细胞的群体中是可检测的,所述低温保存的重组细胞被所述一种或多种基因用电穿孔瞬时转染,所述一种或多种基因是OAT3,所述细胞是HEK293。
2.如权利要求1所述的重组细胞,其中所述一种或多种基因各自来源于人或选自小鼠、大鼠、豚鼠、狗和猴的动物物种。
3.如权利要求1所述的重组细胞,其中所述药物转运蛋白的活性在从低温保存中解冻后平板接种之后至少24小时的所述细胞的群体中是可检测的。
4.如权利要求1所述的重组细胞,其中所述药物转运蛋白的活性在从低温保存中解冻后平板接种之后至少48小时的所述细胞的群体中是可检测的。
5.如权利要求1所述的重组细胞,其中所述药物转运蛋白的活性在从低温保存中解冻后平板接种之后至少72小时的所述细胞的群体中是可检测的。
6.制备低温保存的瞬时转染的重组细胞的方法,所述方法包括:
用一种或多种编码药物转运蛋白的基因瞬时转染细胞以产生瞬时转染的重组细胞;和
转染的48小时内低温保存所述瞬时转染的重组细胞;
其中细胞的瞬时转染步骤包括电穿孔,所述一种或多种基因是OAT3,所述细胞是HEK293。
7.如权利要求6所述的方法,其中,所述瞬时转染的重组细胞在转染后30分钟至24小时被低温保存。
8.一种低温保存的瞬时转染的重组细胞,由权利要求6所述方法制备得到。
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