[发明专利]一种高效检测禽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的分析方法

说明书

本发明涉及兽药残留检测领域，具体涉及一种高效检测禽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的分析方法，本发明首次建立禽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留超高效液相色谱‑串联质谱检测法，本发明的目标化合物出峰时间短（1min左右），灵敏度高（CAP、TAP、FF和FFA在禽蛋中的LOD分别为0.03、0.3、0.1、0.4µg/kg，LOQ分别为0.08、0.8、0.27、1.2µg/kg），四种目标化合物在禽蛋中添加浓度分别为LOQ、0.5MRL、1.0MRL、2.0MRL的回收率分别大于或等于90.31%、93.40%、92.32%和92.35%，日内、日间相对标准偏差分别低于4.33%和5.77%。同时该方法洗脱程序简单，溶剂消耗少，分析效率更高，耗时短（每个样品只需要4min），更适合在大批量样品分析中应用与推广。

技术领域

本发明涉及兽药残留检测领域，具体涉及一种高效检测禽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的分析方法。

背景技术

目前，国内外关于氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的检测方法有微生物法、免疫学检测方法、气相色谱法、高效液相色谱法、气相色谱-串联质谱法、高效液相色谱-串联质谱，但超高效液相色谱-串联质谱检测法(UPLC-MS/MS)检测禽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的方法还尚未见报道。

发明内容

为了解决禽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺分离的问题，本发明提供一种高效检测禽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的分析方法，该方法的目标化合物出峰时间短，灵敏度高，洗脱程序简单，溶剂消耗少，分析效率更高，耗时短。

为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：一种高效检测禽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的分析方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)禽蛋样品提取与净化；

2)超高效液相色谱-串联质谱检测：

a.色谱条件：以Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈为色谱柱；以A相：2mM乙酸铵的水溶液和B相：2mM乙酸铵的乙腈体系为流动相；流速：0.2mL/min；设置特定的梯度洗脱程序；

b.检测器为质谱检测器，电喷雾离子源ESI；扫描方式：正离子扫描FFA和负离子扫描 CAP、TAP、FF和d₅-CAP；检测方式：多反应监测MRM；电喷雾离子化电压IS：5000～5500 V正离子扫描、4000～4500V负离子扫描；离子源温度TEM：450～500℃；离子源喷雾气 Gas1:40～45psi正离子扫描、45～50psi负离子扫描；辅助加热气Gas2：45～50psi 正离子扫描、35～40psi负离子扫描；气帘气CUR：12～15psi正离子扫描、16～20psi 负离子扫描；碰撞气CAD：6～8psi；碰撞室出口电压CXP：5～6V正离子扫描、7～8V 负离子扫描；射入电压EP：6.5～7.5V正离子扫描、11～13V负离子扫描；每个定量离子对驻留时间：100.0ms，每个定性离子对驻留时间：100.0ms。

在步骤b中，CAP、TAP、FF、FFA和d5-CAP的保留时间和其它质谱参数如下：

注：^*定量离子对。

步骤a中，所述特定的梯度洗脱程序如下：

分离禽蛋中CAP、TAP、FF、FFA和d₅-CAP的梯度洗脱程序