[发明专利]一种高效检测禽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的分析方法

权利要求书

1.一种高效检测禽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的分析方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)禽蛋样品提取与净化；

2)超高效液相色谱-串联质谱检测：

a.色谱条件：以Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈为色谱柱；以A相：2mM乙酸铵的水溶液和B相：2mM乙酸铵的乙腈体系为流动相；流速：0.2mL/min；设置特定的梯度洗脱程序；

b.检测器为质谱检测器，电喷雾离子源ESI；扫描方式：正离子扫描FFA和负离子扫描CAP、TAP、FF和d₅-CAP；检测方式：多反应监测MRM；电喷雾离子化电压IS：5000～5500V正离子扫描、4000～4500V负离子扫描；离子源温度TEM：450～500℃；离子源喷雾气Gas1:40～45psi正离子扫描、45～50psi负离子扫描；辅助加热气Gas2：45～50psi正离子扫描、35～40psi负离子扫描；气帘气CUR：12～15psi正离子扫描、16～20psi负离子扫描；碰撞气CAD：6～8psi；碰撞室出口电压CXP：5～6V正离子扫描、7～8V负离子扫描；射入电压EP：6.5～7.5V正离子扫描、11～13V负离子扫描；每个定量离子对驻留时间：100.0ms，每个定性离子对驻留时间：100.0ms。

2.根据权利要求1所述的一种高效检测禽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的分析方法，其特征在于，在步骤b中，CAP、TAP、FF、FFA和d5-CAP的保留时间和其它质谱参数如下：

注：^*定量离子对。

3.根据权利要求1所述的一种高效检测禽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的分析方法，其特征在于，在步骤a中，所述特定的梯度洗脱程序如下：分离禽蛋中CAP、TAP、FF、FFA和d₅-CAP的梯度洗脱程序

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4.根据权利要求1所述的一种高效检测禽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的分析方法，其特征在于，步骤(1)具体过程为：准确称取均质好的空白禽蛋样品放于研钵中，并加入硅藻土研磨，装入萃取池中，在1500psi，80℃条件下用ASE萃取，每个萃取池用甲醇:氨水:水溶液以97:2:1，V/V的比例静态萃取，氮气吹扫，收集萃取液待用；收集的萃取液转移至离心管，置于45～50℃离心浓缩仪上蒸发浓缩；萃取液蒸发浓缩后，加入纯乙腈，漩涡振荡混匀，加入正己烷漩涡混匀，去脂，静置，弃去上层正己烷，下层提取液重复提取一次，然后置于45～50℃氮吹仪上吹干；将氮吹后的样品用55％乙腈分两次漩涡振荡溶解，12100×g离心10～15min，过0.22μm有机相针式滤器，滤液供UPLC-MS/MS检测。

5.根据权利要求1所述的一种高效检测禽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的分析方法，其特征在于，步骤a中，色谱柱：Waters ACQUITY UPLC BEHC18，2.1×50mm，1.7μm；保护柱：Waters VanGuardTM BEH C18，1.7μm。

6.根据权利要求1所述的一种高效检测禽蛋中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺多残留的分析方法，其特征在于，步骤a中，进样体积：10μL；柱温25～30℃。