[发明专利]一种A21978C高产菌株及其应用

说明书

本发明公开了一种A21978C的高产菌株，该菌株保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏号为CGMCC No.16016。本发明还公开了所述的A21978C高产菌株CGMCC No.16016用于生产达托霉素的应用。所述的A21978C高产菌株CGMCC No.16016，经发酵培养后，A21978C的产量可达到3.47g/L左右，是高产A21978C的优良菌株，具有广泛的工业应用前景。

技术领域

本发明属于生物工程的技术领域，具体的说，是关于一种A21978C高 产菌株及其应用。

背景技术

达托霉素是治疗革兰氏阳性菌感染、特别是耐药菌感染的重磅炸弹药 物，临床应用于革兰氏阳性菌引起的皮肤感染和MRSA引起的心内膜炎。达 托霉素是从链霉菌产生的脂肽类次级代谢产物A21978C混合物中分离出的 最小的组分。A21978C混合物均含有一个13个氨基酸组成的母核，包含了 环上10个氨基酸和环外的三个氨基酸残基。不同的是达托霉素在结构上含 有一个直链癸酸侧链，其他三个主组分在N末端分别含有11、12、13个碳原子的支链脂肪酸链。利用产A21978C的菌株在发酵罐上补加癸酸后可以 实现大规模工业化生产达托霉素。由于发酵单位低，达托霉素工业化生产 难度大、成本高，从而导致其价格昂贵、产量远远不能满足市场需求。目 前国内外应用的菌株，其达托霉素产量约在2.0g/L至3.0g/L之间。中国 专利文献CN102796680B公开了通过补加癸酸和癸醛组合物作为前体，发酵 玫瑰孢链霉菌生产达托霉素，其效价为2.55g/L。专利文献CN106133131A 公开了通过诱变获得丝状链霉菌(streptomyces filamentosus)突变株， 其罐发酵生产达托霉素的能力为2.75g/L。

发明内容

为了克服现有技术中的不足，本发明旨在提供一种A21978C高产菌株。 为此，本申请以小链霉菌(Streptomyces parvus)CGMCC No.4027为出发 菌株，经基因工程和诱变育种，筛选到一株A21978C高产菌株，并将其进 行了保藏，保藏号为CGMCC No.16016。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

作为本发明的第一个方面，一种A21978C高产菌株，其保藏号为CGMCC No.16016。

作为本发明的第二个方面，所述的A21978C高产菌株CGMCC No.16016 用于生产达托霉素的应用。

作为本发明的第三个方面，一种达托霉素的生产方法，通过发酵上述 所述的A21978C高产菌株CGMCC No.16016获得A21978C，再通过补加癸酸 获得达托霉素。

根据本发明，所述发酵的条件如下：

发酵培养基(wt)：玉米淀粉0.5％，葡萄糖0.8％，糊精3.2％，黄豆饼 粉2.5％，(NH₄)₂SO₄ 0.5％，Fe(NH₄)₂(SO₄)₂·6H₂O 0.06％，MnSO₄ 0.02％，pH 7.5；

发酵培养条件：28℃，通气量1vvm，搅拌转速150～400rpm，罐压 0.05mpa；DO保持20％以上，pH用氨水控制在6.5；自发酵培养20h开始补 加50％癸酸溶液，补加速率为0.15ml/L·h，每培养36h，前体补加速率 增加0.1ml/L·h，至约200h发酵结束。

本发明的有益效果：本发明提供的A21978C高产菌株，其遗传性状稳 定，具有良好的工业化应用价值。本发明的A21978C高产菌株，经过发酵 获得的发酵液中的A21978C的含量可达到3.47g/L左右，是高产A21978C 的优良菌株。

附图说明

图1为出发菌株和突变菌株的色谱图。