[发明专利]一种化学发光分析测定方法及使用该方法的系统、试剂盒

说明书

本发明涉及化学发光技术领域的一种化学发光分析测定方法、一种使用化学发光分析测定方法的系统和一种试剂盒。本发明方法通过多次读数后，选取两次读数来拓宽检测范围、指示HD‑HOOK样本或超检测范围样本，并在检测过程中，简便快速地计算出待测物浓度。

技术领域

本发明涉及化学发光技术领域，具体涉及一种化学发光分析测定方法、一种使用化学发光分析测定方法的系统和一种试剂盒。

背景技术

化学发光分析则是近年来发展较迅速的非放射性免疫检测技术，其原理是利用化学发光物质进行信号的放大，并借助其发光强度，对免疫结合过程进行直接测定，该法已成为免疫学检测的重要方向之一。光激化学发光法是化学发光分析技术的常用方法之一，可用于研究生物分子间的相互作用，临床上主要用于疾病的检测。该技术整合了高分子微粒技术、有机合成、蛋白质化学及临床检测等相关领域的研究。与传统的酶联免疫分析方法相比，它具有均相、灵敏度高和操作简便易于自动化等特点。因此，其应用前景十分广阔。

化学发光中的双抗夹心的检测模式中，当待检测物质浓度高到一定浓度时，会因为不能形成双抗夹心复合物从而信号值偏低的现象，称为高剂量-钩状效应(HD-HOOK效应)。也就是说，高剂量-钩状效应是指在双位点夹心免疫实验中，其剂量反应曲线的高剂量区段，线性走向不是呈平台状无限后延，而是向下弯曲状，似一只钩子，导致产生假阴性的现象。HD-HOOK效应在免疫检测中经常发生，其发生率占阳性样本30％左右。由于HD-HOOK效应的存在导致被检测样本不能被正确区分为是由于其浓度超出检测试剂盒的线性范围还是本身浓度就是该值，以至于实验误诊，尤其是导致假阴性率上升。

因此，亟需提供一种能拓宽检测范围、避免HD-HOOK效应的化学发光分析测定方法。

发明内容

针对现有技术中所存在的缺陷，本发明的目的在于提供一种化学发光分析测定方法，本发明方法通过多次读数后，选取两次读数来拓宽检测范围、指示HD-HOOK样本或超检测范围样本，并在检测过程中，简便快速地计算出待测物浓度。

为了实现上述及相关目的，本发明的第一方面提供了一种化学发光分析测定方法，其包括如下步骤：

(1)将疑似含待测目标分子的待测样本与发生化学发光反应所需的试剂混合后反应形成待测混合物；

(2)先后t次激发所述待测混合物发生化学发光，n次记录所述化学发光的信号值；其中，第n次记录的化学发光信号值记为读数RLUn；

(3)选取所述n次记录的化学发光信号值中的任意两次信号值，分别记为读数RLUm和读数RLUk，并将RLUm和RLUk的差值增幅记为A；；

(4)根据一系列已知浓度的含待测目标分子的标准物质以及其在步骤(2)和步骤(3)中任意两次反应的读数RLUm’和RLUk’的差值增幅A’做标准曲线；

(5)通过将步骤(3)中得到的所述增幅A与步骤(4)中得到的所述标准曲线进行比较来确定待测目标分子的浓度；

其中，t、n、m和k均为大于0的自然数，且k＜m≤n≤t，n≥2。

在本发明的一些实施方式中，所述增幅A＝(RLUm/RLUk-1)×100％。

在本发明的另一些实施方式中，所述n大于2。

在本发明的一些实施方式中，步骤(1)中，所述化学发光反应为均相化学发光反应。

在本发明的一些优选的实施方式中，步骤(1)中，所述发生化学发光反应所需的试剂包括受体试剂和供体试剂；其中：

所述供体试剂中包含供体，所述供体能够在激发状态下生成单线态氧；

所述受体试剂中包含受体，所述受体能够与单线态氧反应产生可检测的化学发光信号值。