[发明专利]一株米氏假单胞杆菌及其在防治丝瓜根结线虫中的应用

说明书

本发明公开了一株米氏假单胞杆菌及其在防治丝瓜根结线虫中的应用。该菌株为米氏假单胞杆菌(Pseudomonas migulae)菌株YT1001，已于2018年1月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.15214。本发明的米氏假单胞杆菌菌株容易在在丝瓜根系周围定殖，且防治丝根结线虫的效果好，最后一次施药后14d其防治效果为57.17％。从丝瓜长势看，米氏假单胞杆菌菌株YT1001对丝瓜具有明显的促进生长效果，没有药害，安全可靠。

技术领域

本发明属于植物病害生物防治技术领域。具体而言，本发明涉及一株能够高效防治丝瓜根结线虫的米氏假单胞杆菌及其用途，以及采用该米氏假单胞杆菌制备的生物防治制剂。

背景技术

植物寄生线虫是一类重要的植物病原物，每年给全球农业造成约1570亿美元的经济损失。常见根结线虫有四个种类，即南方根结线虫(Meloidogyne incognita)、北方根结线虫(M.hapla)、爪哇根结线虫(M.javanica)和花生根结线虫(M.arenaria)。据不完全统计，根结线虫的寄主植物多达3000多种，包括经济、粮食、果树、蔬菜、花卉等作物，其中危害最为严重的是茄科、葫芦科和十字花科等植物。发病田的寄主常年减产15％～20％，严重时达到70％以上。丝瓜是农家庭院种植蔬菜的主要品种，在满足人们日常需要、改善生活条件方面起着重要作用。然而丝瓜根结线虫严重威胁着丝瓜生产。一般病株率为26％～48％，死亡率9.5％。

目前防治丝瓜根结线虫的方法包括农业防治和化学防治。其中，农业防治效率低、劳动量大、而且防治作用并不明显；而化学防治的长期用药，使丝瓜根结线虫产生抗药性，最终导致防治效果不理想，再加上化学药剂的大量使用对丝瓜质量安全与环境造成许多负面影响。而生物防治具有对人畜安全、环境兼容性好且病原菌不易产生抗药性等优点，因此丝瓜根结线虫的绿色无公害生物防治越来越多的受到人们关注。

假单胞菌在自然界分布广泛，种类繁多，是植物根际土壤周围起生物防治功能的主要细菌类群。目前，世界各地对假单胞菌的应用研究有了大量的报道，涉及领域包括用于农业生物防治、植物生长调节、环境保护和医药开发等，其中，在生物防治与促植物生长方面的研究最为透彻、应用最为广泛，生物防治主要作用对象为植物病原真菌，如雪霉叶枯菌、镰刀菌、棉花黄萎病菌、炭疽菌等。假单胞菌对植物生长的促进作用主要通过其产生的植物生长激素。在环境保护方面，假单胞菌主要被用于化学农药的降解、废水处理、油污处理等。用假单胞菌防治线虫鲜有报道。

发明内容

本发明的目的是提供一株用于高效防治丝瓜根结线虫的新的微生物——米氏假单胞杆菌YT1001。本发明的米氏假单胞杆菌菌株容易在在丝瓜根系周围定殖，且防治丝根结线虫的效果好，具有良好的应用前景。

本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：本发明所提供的菌株为米氏假单胞杆菌(Pseudomonas migulae)菌株YT1001，是从青岛胶州湾大沽河入海口湿地泥中分离获得的，已于2018年1月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏号为CGMCCNo.15214。其具有以下生物学特性：革兰阴性，杆状，运动，不产芽胞；在NBTA平板上，菌落均呈红色；在KMB平板上，菌落圆形隆起，边缘整齐，湿润，粘稠，易挑起，菌落初期透明，后期脓状样，菌落较大，显不同程度的黄色。

本发明米氏假单胞杆菌(P.migulae)菌株YT1001的培养方法或繁殖方法包括：

(1)普通培养保存采用NA培养基，配方为：胰蛋白胨10g，牛肉粉3g，氯化钠5g，琼脂15g，蒸馏水1000mL，pH调至7.2～7.4。

(2)实验室液体培养采用NYBD液体培养基，配方为：牛肉浸膏8g，酵母浸膏5g，葡萄糖10g，氯化钠4.5g，水1000mL，pH调至7.2～7.4。