[发明专利]一种利用毕赤氏酵母发酵烟草的方法

说明书

本发明公开了一种利用毕赤氏酵母发酵烟草的方法，包括以下步骤：将毕赤氏酵母FBKL2.0008(Pichia kudriavzevii FBKL2.0008)菌种接种于斜面培养基上，在28℃下培养24h‑48h，待菌长满试管；将斜面培养的菌种在麦芽汁琼脂培养基上划线活化，在28℃下培养24h‑48h；种子液制备：向烟草中按0.4ml/g加入菌液，每隔3d补加无菌水0.2ml/g烟草，置于28℃‑30℃环境培养15d‑20d，低温40℃‑60℃干燥15min‑30min即得。本发明制得的烟草带玫瑰花香、粉香、蜂蜜样香气。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用毕赤氏酵母发酵烟草的方法。

背景技术

烟叶收采后，需根据其特性及处理传统，进行不同方式的炮制，初步糖化、熟成，进一步处理。烟叶通过发酵处理使烟草的化学成份产生变化，风味变得更柔和，并降低其尼古丁的含量。烟草的新型加工工艺在已经从种植工艺改良转向到烟草风味的研究.添加米曲霉发酵制备口用型烟草制品烟丝；添加淀粉糖浆和促发酵肽等可以改良烟丝的品质；利用烟草表面的微生物进行自然发酵来提高烟草的风味，同时高效降解烟叶中淀粉和蛋白质均利用筛选自烟叶上的菌株通过扩大培养再接种到烟叶上进行发酵来提高烟丝质量；雪茄衣人工发酵是通过添加菊花，绿茶，米酒提高风味及品质。

近年来，市面上用明胶小球包裹白酒，或者在烟丝上喷洒白酒制成具有不同白酒风格特征的卷烟深受欢迎，但这种方法会使烟丝的酒香味不均匀，也会受酒品质的影响。

发明内容

本发明的目的在于克服上述缺点而提供的一种烟草带玫瑰花香、粉香、蜂蜜样香气的利用毕赤氏酵母发酵烟草的方法。

本发明的一种利用毕赤氏酵母发酵烟草的方法，包括以下步骤：

(1)斜面培养：将毕赤氏酵母FBKL2.0008(Pichia kudriavzevii FBKL2.0008)菌种接种于斜面培养基上，在28℃下培养24h-48h，待菌长满试管；

(2)菌种活化：将斜面培养的菌种在麦芽汁琼脂培养基上划线活化，在28℃下培养24h-48h；

(3)种子液制备：配制液体培养基(麦芽膏粉130g/L,氯霉0.1g/L,PH5.8-6.2)，三角瓶盛装，121℃灭菌20min，然后在超净工作台接入活化的菌种到液体培养基中，在28℃摇床上培养24h-48h；

(4)烟草发酵：向烟草中按0.4ml/g加入菌液，每隔3d补加无菌水0.2ml/g烟草，置于28℃-30℃环境培养15d-20d，低温40℃-60℃干燥15min-30min即得。

上述的一种利用毕赤氏酵母发酵烟草的方法，其中：步骤(4)的烟草发酵在烟草进行发酵前切丝，或在烟草切丝后再发酵。

上述的一种利用毕赤氏酵母发酵烟草的方法，其中：斜面培养基为麦芽汁琼脂培养基，成份为麦芽膏粉130g/L，氯霉素0.1g/L，琼脂15g/L，PH5.8-6.2。

上述的一种利用毕赤氏酵母发酵烟草的方法，其中：毕赤氏酵母FBKL2.0008(Pichia kudriavzevii FBKL2.0008)已于2015年6月17日保藏到中国典型培养物保藏中心(地址：中国武汉武汉大学)，保藏号：CCTCC NO：M2015380。