[发明专利]基于免疫磁珠标记的SERS分选方法有效
申请号: | 201810772806.0 | 申请日: | 2018-07-14 |
公开(公告)号: | CN108918500B | 公开(公告)日: | 2020-10-23 |
发明(设计)人: | 温良恭;王麟;吴欣羽 | 申请(专利权)人: | 北京航空航天大学青岛研究院 |
主分类号: | G01N21/65 | 分类号: | G01N21/65;G01N15/10;B07C5/34 |
代理公司: | 青岛中天汇智知识产权代理有限公司 37241 | 代理人: | 刘晓 |
地址: | 266000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 免疫 标记 sers 分选 方法 | ||
1.基于免疫磁珠标记的SERS分选方法,其特征在于,包括如下步骤,
S1.在每种目标细胞均特有的表面受体上,标记修饰有与该表面受体配对的抗体的免疫磁珠;
S2.筛选出目标细胞:
将经过步骤S1标记后的目标细胞通过细胞筛选装置进行筛选,所述细胞筛选装置的主体结构被一层细胞筛分割成上层、下层腔体,所述腔体中充满了细胞缓冲液;筛选的具体操作步骤为:
S21.将包含有游离的免疫磁珠、被免疫磁珠标记的目标细胞和其他细胞的样品输入到细胞筛选装置的下层腔体中;
S22.对细胞筛选装置施加纵向磁场和横向振荡,将免疫磁珠吸入上层腔体,目标细胞吸附在细胞筛的下表面;
S23.分别冲洗得到包含游离的免疫磁珠的溶液、包含其他细胞的溶液和包含被免疫磁珠标记的目标细胞的溶液;
S3.根据每种目标细胞所特有的表面受体,分别在每种目标细胞上,标记修饰有与该表面受体配对的抗体的表面增强拉曼标记SERS-TAG;
S4.分别对标记后的每个目标细胞进行表面增强拉曼检测以确定其种类,根据目标细胞的种类对目标细胞进行分类。
2.根据权利要求1所述的基于免疫磁珠标记的SERS分选方法,其特征在于,所述步骤S23的具体操作步骤为:
S231.撤销纵向磁场和横向振荡,对上层腔体进行冲洗,得到包含游离的免疫磁珠的溶液;
S232.施加纵向磁场,对下层腔体进行冲洗,得到包含其他细胞的溶液;
S233.撤销纵向磁场,对下层腔体进行冲洗,得到包含被免疫磁珠标记的目标细胞的溶液。
3.根据权利要求2所述的基于免疫磁珠标记的SERS分选方法,其特征在于,所述步骤S23的具体操作步骤为:
S231.撤销横向振荡,对下层腔体进行冲洗,得到包含其他细胞的溶液;
S232.撤销纵向磁场,对上层腔体进行冲洗,得到包含游离的免疫磁珠的溶液,对下层腔体进行冲洗,得到包含被免疫磁珠标记的目标细胞的溶液。
4.根据权利要求1-3任一项所述的基于免疫磁珠标记的SERS分选方法,其特征在于:所述纵向磁场由永磁体、软磁体或者电磁体产生。
5.根据权利要求1-3任一项所述的基于免疫磁珠标记的SERS分选方法,其特征在于:所述横向振荡包括横向振荡磁场和/或横向振荡波和/或横向交变水流。
6.根据权利要求1-3任一项所述的基于免疫磁珠标记的SERS分选方法,其特征在于:所述样品输入以及冲洗的操作是通过注射泵或者微流泵来实现的。
7.根据权利要求1所述的基于免疫磁珠标记的SERS分选方法,其特征在于,在步骤S4中,将步骤S3标记后的目标细胞经过微流系统进行分类,所述微流系统包括输入通道以及与输入通道相连通的若干输出通道,输入通道上设置有拉曼检测点,所述步骤S4的具体操作步骤为:
S41.使目标细胞在输入通道内形成单细胞流;
S42.对经过拉曼检测点的目标细胞进行表面增强拉曼检测以确定其种类;
S43.根据目标细胞的种类,对目标细胞施加物理场力,将不同种类的目标细胞分离至不同的输出通道内进行收集。
8.根据权利要求7所述的基于免疫磁珠标记的SERS分选方法,其特征在于,所述步骤S43中,对细胞施加的物理场包括电场、磁场、光场和流体场。
9.根据权利要求7所述的基于免疫磁珠标记的SERS分选方法,其特征在于,所述拉曼检测点设置有拉曼光谱仪。
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