[发明专利]一种天麻伴生蜜环菌栽培种快繁方法

权利要求书

1.一种天麻伴生蜜环菌栽培种快繁方法，其特征在于：液-液菌种结合，分三个阶段制备蜜环菌栽培种、38天完成整个过程；蜜环菌栽培种能从水浸渍状态转化为膏状、污染率低至2%，栽培种常温避光保存可达1年。

2.根据权利要求1所述的液-液菌种结合具体是指，通过二次蜜环菌液体传代培养后，转接蜜环菌液体菌种到水浸渍的枝条栽培种培养基中培养蜜环菌。

3.根据权利要求1所述分三个阶段制备蜜环菌栽培种是指，先制备蜜环菌一级液体菌种（12天），再制备蜜环菌二级液体菌种（4天），最后制备蜜环菌栽培种（22天）。

4.一、二级液体菌种培养基成分一致，培养参数均为22℃暗培养、150r/min、二级液体菌接种量1:30（体积比）。

5.根据权利要求2所述的二次蜜环菌液体传代培养是指，将蜜环菌一级液体菌种无菌匀质后，转接匀浆后的菌丝至液体培养基中培养蜜环菌二级液体菌种。

6.根据权利要求2所述枝条栽培种培养基是指，直径1-2㎝带皮的青冈树枝，斜切成长1.5㎝的枝条后，晒干后水浸渍制成的枝条种培养基。

7. 根据权利要求3所述液体培养基参数具体是指，葡萄糖40g/L、无水乙醇28g/L、酵母粉6g/L、蛋白胨12g/L、硫酸镁2g/L、磷酸二氢钾1g/L、VB₁ 0.01g/L、VB₂ 0.03g/L，各成分充分溶解后装液量为150ml、封瓶灭菌。

8.根据权利要求6所述的装液量，具体指体积为250ml的玻璃三角瓶，装150ml液体培养基。

9.根据权利要求6所述的封瓶灭菌，具体指用透气封瓶膜封口、121℃灭菌30min。