[发明专利]一种β淀粉样肽1-42的固相合成法

权利要求书

1.一种β淀粉样肽1-42的固相合成法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）固相合成Fmoc-Ala-HMP-TentaGel 树脂；

（2）根据β淀粉样肽1-42的肽序在所述的Fmoc-Ala-HMP-TentaGel 树脂上偶联氨基酸得到β淀粉样肽1-42树脂肽：NH₂-Asp(Otbu)-Ala-Glu(Otbu)-Phe-Arg(Pbf)-His(Trt)-Asp(Otbu)-Ser(tbu)-Gly-Tyr(tbu)-Glu(Otbu)-Val-His(Trt)-His(Trt)-Gln(Trt)-Lys(Boc)-Leu-Val-Phe-Phe-Ala₂₁-Glu(Otbu)-Asp(Otbu)-Val-Gly₂₅-Ser(tbu)-Asn(Trt)-Lys(Boc)-Gly₂₉-Ala₃₀-Ile-Ile-Gly₃₃-Leu-Met-Val- Gly₃₇- Gly₃₈-Val-Val-Ile-Ala-HMP-TentaGel 树脂；

肽序中Ala₂₁ 和Ala₃₀中一个或两个用带Hmb/Dmb基团的Ala偶联，Gly₂₅、Gly₂₉、Gly₃₃、Gly₃₇和Gly₃₈中一个或多个用带Hmb/Dmb基团的Gly偶联；

（3）所述的β淀粉样肽1-42多肽树脂经裂解得到β淀粉样肽1-42粗品。

2.根据权利要求1所述的合成法，其特征在于，步骤（1）具体内容包括如下步骤

取HMP-TentaGel树脂用DCM浸泡，使树脂充分溶胀，抽干，加入Fmoc-Ala-OH，选择TBTU/HOBT/DIEA作为催化剂，选择体积比为1:1的DMF/NMP混合溶液作为溶剂，反应2-8小时，抽干，用DMF洗涤3次，再加入体积比2:2:1的乙酸酐:吡啶:DMF的混合溶液，反应0.5-2小时，抽干，用DMF洗涤6次，抽干，获得Fmoc-Ala-HMP-TentaGel 树脂。

3.根据权利要求2所述的合成法，其特征在于，HMP-TentaGel树脂的取代度为1.0mmol/g， Fmoc-Ala-OH，TBTU，HOBT和DIEA的摩尔比为1:1:1:2。

4.根据权利要求1所述的合成法，其特征在于，步骤（2）具体内容包括如下步骤：

在步骤（1）所获得的Fmoc-Ala-HMP-TentaGel 树脂中，加入脱帽试剂，反应30分钟，抽干，用DMF洗涤5次，抽干；加入Fmoc-Ile-OH,选择DIC/HOBT/DIEA作为缩合剂，DMF做溶剂，反应2-4小时，茚三酮法检测反应终点，抽干，用DMF洗涤3次，抽干，获得Fmoc-Ile-Ala-HMP-TentaGel 树脂；然后再加入脱冒试剂，脱保护反应，再依次加入保护氨基酸，如此反复，直至连完最后一个天冬氨酸，脱保护反应，DMF洗涤5次，甲醇洗涤2次收缩树脂，抽真空干燥24小时，得到β淀粉样肽1-42多肽树脂。

5.根据权利要求4所述的合成法，其特征在于，Fmoc-Ala-HMP-TentaGel 树脂的取代度在0.3mmol/g-0.5mmol/g之间，脱帽试剂为体积比20%的PIP/DMF混合溶液，Fmoc-Ile-OH的量为Fmoc-Ala-HMP-TentaGel 树脂摩尔量的2倍，每一步保护氨基酸的量的是Fmoc-Ala-HMP-TentaGel 树脂摩尔量的2倍，DIC/HOBT的量是Fmoc-Ala-HMP-TentaGel树脂摩尔量的2倍，DIEA的量是Fmoc-Ala-HMP-TentaGel树脂摩尔量的4倍。