[发明专利]用于富集衍生自甜叶菊的糖苷组合物中的新蛇菊苷B和/或新蛇菊苷D的方法

说明书

本发明涉及使用吸附/脱附色谱以制备包含新蛇菊苷B和/或新蛇菊苷D的经富集的组合物的方法。使用吸附‑脱附色谱工艺可从衍生自甜叶菊的糖苷组合物制备富集新蛇菊苷B和/或新蛇菊苷D组分的组合物，该色谱工艺中色谱床的固定相包含大孔中性吸附树脂。

本申请为于2011年11月18日提交的申请号201180064931.2的名称为“使用具有大孔中性吸附树脂的吸附-脱附色谱用于富集衍生自甜叶菊的糖苷组合物中的新蛇菊苷B和/或新蛇菊苷D的方法”的申请的分案申请。

相关申请的交叉引用

本申请要求享有2010年11月19日提交的，名为“METHOD FOR THE ENRICHMENT OFREBAUDIOSIDE AND/OR REBADIOSIDE D IN STEVIA-DERIVED GLYCOSIDE COMPOSITIONSUSING ABSORB-DESORB CHROMATOGRAPHY WITH A MACROPOROUS NUETRAL ADSORBENTRESIN”的美国临时专利申请61/415,548的权益，将其全部援引加入本文。

技术领域

本发明涉及使用吸附/脱附色谱以制备包含新蛇菊苷B和/或新蛇菊苷D(reb-B和/或reb-D)的经富集的组合物。如本文所述，已经发现使用吸附-脱附色谱工艺从衍生自甜叶菊的糖苷组合物中可制备经富集的reb-B和/或reb-D，该色谱工艺中色谱床的固定相包含大孔中性吸附树脂。可用树脂的实例包括“SP70”和“SP710”(购自Mitsubishi)和“FPX66”(购自Dow)。

发明内容

在一些实施方案中，本发明提供了制备包含reb-B、reb-D的至少一种或它们的混合物的经富集的组合物的方法，该方法包括以下步骤：

(A)提供pH经调节的衍生自甜叶菊的糖苷溶液，其包含：(i)选自reb-B和reb-D的至少一种糖苷，和(ii)至少一种其他的衍生自甜叶菊的糖苷；

(B)提供大孔中性吸附树脂；

(C)使大孔中性吸附树脂与衍生自甜叶菊的糖苷溶液接触，以使衍生自甜叶菊的糖苷溶液中的至少一部分糖苷被吸附至吸附剂上；

(D)提供至少一种包含乙醇和水的混合物的洗脱溶剂，配制该洗脱溶剂，以从吸附剂选择性地洗脱reb-B、reb-D或它们的混合物；

(E)使大孔中性吸附树脂与乙醇和水的洗脱溶剂接触，以洗脱富集选自reb-B和reb-D的至少一种糖苷的组合物；以及

(F)任选地从大孔中性吸附树脂洗脱至少一部分剩余的被吸附的糖苷。

在本发明的某些实施方案中，衍生自甜叶菊的糖苷溶液的pH可以是碱性的pH。在这些实施方案的某些中，pH经调节的衍生自甜叶菊的糖苷溶液的pH可以为约8至约11。在其他实施方案中，pH经调节的衍生自甜叶菊的糖苷溶液的pH可以为约8至约10。在这些实施方案的一些中，至少一种洗脱溶剂包含约20-35％w/w的乙醇和约65-80％w/w的水。在其他的实施方案中，至少一种洗脱溶剂包含约25-33％w/w的乙醇和约67-75％w/w的水。在这些实施方案中，富集至少一种糖苷的组合物富集reb-B和reb-D。在这些实施方案的一些中，用后续洗脱溶剂从大孔中性吸附树脂洗脱至少一部分剩余的被吸附的糖苷，其中后续洗脱溶剂包含约36-100％w/w的乙醇和约0-64％w/w的水，并且用后续洗脱溶剂洗脱的组合物富集reb-A。