[发明专利]一种郁香忍冬离体花粉短期贮藏的方法

说明书

本发明属于植物有性繁殖技术领域，公开了一种郁香忍冬离体花粉短期贮藏的方法，收集郁香忍冬当日散粉的新鲜花粉，检测花粉萌发率，萌发率在80%以上时，将收集的新鲜花粉分装至离心管内，封好管口，置于‑20℃贮藏，贮藏约40d左右时，取出花粉，检测其萌发率，一般仍能达到40%，此时，其他亲本正好进入盛花期，可将花粉取出，进行人工辅助授粉。本发明有效解决了郁香忍冬杂交育种花期不遇的问题，操作简便易行，保存成本低且大大延长花粉具有活力的时间；通过开展离体花粉低温贮存研究，对于促进郁香忍冬的人工杂交育种工作具有重要意义。

技术领域

本发明属于植物繁殖技术领域，涉及一种植物花粉的贮藏方法，具体涉及一种郁香忍冬离体花粉短期贮藏的方法。

背景技术

郁香忍冬（Lonicera fragrantissima Lindl. et Paxt.），是忍冬科忍冬属的一种半常绿灌木，高达2m，花香浓郁，是北方早春季节重要的芳香类花木，先花后叶，开花时色香兼备，花量繁盛，近年来，常被应用于垂直绿化中，是一种非常好的观花、观果园林绿化树种。

郁香忍冬具有花香浓郁，早春开花等优良特性，在忍冬属植物的新品种培育中，作为优秀的亲本材料可供选择，但是郁香忍冬通常在2月中旬到3月初进入盛花阶段，而与其亲缘关系较近的忍冬属的其他植物（如金银忍冬（Lonicera maackii (Rupr.) Maxim.var. maackii）等），盛花期一般都在4月中下旬，花期不遇，限制了人工杂交育种工作的进行，因此，探索一种短期贮藏郁香忍冬离体花粉的方法显得极为必要，

成熟的花粉含有植物的全部遗传物质信息，在自然条件下，许多花粉的寿命非常短，这给种质资源研究和杂交育种工作带来极大的不便，同时也不利于相关的植物遗传研究。进行离体花粉短期贮藏研究对于解决花期不遇，促进杂交育种工作的开展都具有重要意义。专利CN 201611121492.5记载了一种金银忍冬花粉超低温保存方法，将新鲜金银忍冬花粉从发育良好的母树上在开花当天13:30左右采集后装入1.8ml的冻存管中，即在采后初始含水量为13％～14％左右时将装有花粉的冻存管投入﹣196℃液氮罐中保存，随后采用自来水化冻5min的方式进行化冻。本方法虽可实现花粉的超低温保存，但对保存条件要求较高，一般情况下较难达到，并且操作过程复杂，大大降低了花粉保存的可操作性。

发明内容

郁香忍冬的盛花期早于其亲缘关系较近的忍冬属的其他植物，致使花期不遇，限制了自然条件下的开展人工杂交育种工作，同时，郁香忍冬的花粉寿命短，不易于较长时间的自然存放，阻碍育种进程以及完善种质资源保存。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种短期贮藏郁香忍冬离体花粉的方法，有效克服了郁香忍冬与其亲缘关系较近的忍冬属其他植物的花期不遇的问题，为其种质创新、新品种选育提供参考依据。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现：

本发明所述郁香忍冬离体花粉短期贮藏的方法，采集郁香忍冬花粉，置于花粉贮存容器后，密封花粉贮存容器口，贮藏于5℃～-20℃的冰箱中，贮藏时间40 左右。

作为所述方法的进一步优化，郁香忍冬花粉的采集时间为上午9:00～10:00，所采花粉应为当日散粉的新鲜花粉。

作为所述方法的进一步优化，采集的郁香忍冬新鲜花粉的萌发率不低于80%。

作为所述方法的进一步优化，郁香忍冬新鲜花粉的贮藏温度-20℃，贮藏时间40d左右，花粉萌发率不低于40%。

在上述参数优化的基础上，所述的郁香忍冬离体花粉短期贮藏的方法，其包括以下步骤：

1）于上午9:00～10:00取当日散粉的花朵，用毛刷轻刷已散粉的花粉囊，收集花粉；