[发明专利]一种外周血中氯化琥珀胆碱的检测方法

权利要求书

1.一种外周血中氯化琥珀胆碱的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：

(1)采用缓冲液配置白蛋白储备液，恒温保存；将标准品氯化琥珀胆碱溶于去离子水中，制得氯化琥珀胆碱溶液；

(2)将配置好的白蛋白储备液与疑似中毒者白蛋白标本采用圆二色谱仪分别测定二者圆二色谱(CD谱)，并记录；

(3)将白蛋白储备液稀释后，采用圆二色谱仪检测测定200～300nm波长范围内的CD谱，记录；将白蛋白储备液与氯化琥珀胆碱溶液混合并相互作用后，测定其200～300nm波长范围内的CD谱，记录；

(4)比较白蛋白与氯化琥珀胆碱相互作用前后的α螺旋含量的改变，采用公式：α-helix％＝{-([θ]208-4000)/(33000-4000)}×100计算，并与疑似中毒者白蛋白标本进行比对；

(5)使用光谱仪进行红外光谱测定，在分辨率为4cm^-1条件下进行多次扫描，收集水蒸气的谱图，采用软件对所收集到的水蒸气谱图自动进行水汽校正；

(6)分别取少量缓冲液、白蛋白、氯化琥珀胆碱、氯化琥珀胆碱-白蛋白溶液均匀滴在ZnSe晶片上，扫描后收集样品光谱；

(7)选择差减区域为2200～1300cm^-1，并选择适当差减因子，根据以上步骤分别得到氯化琥珀胆碱作用前后白蛋白的红外差减图谱，并与疑似中毒者白蛋白标本进行比对，检测其中是否含有氯化琥珀胆碱。

2.根据权利要求1所述的一种外周血中氯化琥珀胆碱的检测方法，其特征在于：所述步骤(1)中缓冲液是pH为7.40Tris-HCl缓冲溶液，采用0.20mol/L三羟基甲基氨基甲烷和0.10mol/L盐酸配制而成。

3.根据权利要求1所述的一种外周血中氯化琥珀胆碱的检测方法，其特征在于：步骤(1)中白蛋白储备液的保存温度为4℃。

4.根据权利要求1所述的一种外周血中氯化琥珀胆碱的检测方法，其特征在于：检测步骤中所使用的圆二色谱仪为Olis DSM 1000 Circular Dichroism的CD谱，其中石英池的池径为1mm，并在氮气保护下使用。

5.根据权利要求1所述的一种外周血中氯化琥珀胆碱的检测方法，其特征在于：步骤(4)公式中，用摩尔椭圆率[θ]来表示实验结果，α螺旋含量以CD谱图中208nm处的摩尔椭圆率进行计算。

6.根据权利要求1所述的一种外周血中氯化琥珀胆碱的检测方法，其特征在于：本发明检测中所使用的红外光谱仪为Nicolet Nexus 670 FT-IR光谱仪。