[发明专利]一种效果优异砷螯合型免疫复合物及其制备方法

权利要求书

1.一种砷螯合型免疫复合物，其特征在于，该砷螯合型免疫复合物为以下一种：

砷离子结合于免疫复合物形成的复合物；

或砷离子结合于载体蛋白后与和该载体蛋白特异性结合的抗体所形成的复合物；

或砷离子结合于免疫球蛋白后与载体蛋白结合形成的复合物。

2.根据权利要求1所述的砷螯合型免疫复合物，其特征在于:所述免疫复合物或载体蛋白的结构中至少含有锌指结构、巯基、半胱氨酸残基中的一种，砷离子与免疫复合物或载体蛋白与锌指结构或巯基或半胱氨酸残基相结合。

3.根据权利要求2所述的砷螯合型免疫复合物，其特征在于:所述载体蛋白为抗体蛋白、脂蛋白、血红蛋白、核抗原、异种血清抗原、病毒、细菌、原虫、蠕虫或免疫球蛋白之中的一种。

4.根据权利要求1所述的砷螯合型免疫复合物，其特征在于:该砷离子通过螯合剂与载体蛋白结合后再与能和载体蛋白特异性结合的抗体结合，所述螯合剂为ITCBE、EDTA、多磷酸盐、氨基羧酸、1,3-二酮、羟基羧酸中的一种。

5.一种如权利要求1所述的砷螯合型免疫复合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：先将螯合剂溶液配制完成，再将螯合剂溶于溶剂中，即可得到螯合剂溶液；

S2：取适量载体蛋白，将载体蛋白加入到硼酸盐缓冲溶液中，即可制得载体蛋白溶液；

S3：将已制得的螯合剂溶液加入到载体蛋白溶液中，置于恒温水浴中并搅拌均匀，恒温水浴4-30h，即可得到混合液；

S4：取来透析袋并在透析袋中加入EDTA-NaHCO3溶液煮沸，将透析袋固定在水箱的中部，并在水箱中加入足量的ddH2O，该ddH2O的体积与透析袋中溶液的体积比为95-100:1，重复该步骤2-4次，将S3中的混合装入透析袋中，将透析袋置于恒温水箱中，在恒温水箱中加入足量的ddH2O，该ddH2O的体积与透析袋中溶液的体积比为95-100:1，透析过夜之后，将透析袋中的液体收集。

S5：在从透析袋中收集的液体中加入稀盐酸溶液调整PH至7.0，缓慢滴入砷离子溶液，滴入时不停震荡，滴入完成后置于恒温水浴中并搅拌均匀，恒温水浴4-30h，然后重复S4一次，收集液体，得到砷螯合型抗原。

S6：将S4中透析袋外的溶液与S5中收集的废液混合在一起，向混合后的溶液中加入负载了纳米二氧化钛的活性炭进行吸附，并重复添加上述活性炭材料，再使用原子荧光法对处理过的溶液进行定量分析，当溶液中砷离子富集程度达到0.1mol/ml，回收砷离子再利用。

S7：在上述砷螯合型抗原中加入能与载体蛋白特异性结合的抗体，反应后得到砷螯合型免疫复合物。

6.如权利要求1所述的砷螯合型免疫复合物在制备检测砷螯合循环免疫复合物的试剂或酶联免疫试剂盒中的应用。

7.一种检测砷螯合循环免疫复合物的酶联免疫试剂盒，其特征在于：该试剂盒包括如权利要求1所述的砷螯合型免疫复合物的标准品。

8.如权利要求6所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于，该试剂盒还包括至少一种以下试剂：含有捕获抗原抗体复合物的蛋白的包被液或含有捕获砷的抗体的包被液、酶标抗体。

9.一种定性检测砷螯合型循环免疫复合物的方法，其特征在于，以已知含量的权利要求1所述的砷螯合型免疫复合物作为标准品，采用以下方法之一对样品进行检测：酶联免疫法、酶联免疫与原子吸收光谱结合法、酶联免疫与电感耦合等离子体质谱结合法、提纯免疫复合物与原子吸收光谱结合法、提纯免疫复合物与电感耦合等离子体质谱结合法、电泳与酶联免疫或原子吸收光谱或电感耦合等离子体质谱结合法。