[发明专利]系统性硬化症诊断及PAH预测的生物标志物

说明书

本发明公开了具有1型血小板反应蛋白基序的解聚素和金属蛋白酶4，即ADAMTSL4，或其片段在制备用于预测系统性硬化症中肺动脉高压可能性的试剂中的用途。本发明采用高密度蛋白芯片技术筛选出113个SSc相关自身抗体靶抗原。采用113个SSc相关自身抗体对应靶抗原构建制备SSc相关自身抗体靶抗原蛋白芯片进行临床扩大样本验证。结果显示抗ADAMTSL4抗体在SSc合并PAH患者中的阳性率为14.9％，显著高于SSc不合并PAH患者中的阳性率2.88％，可用于预测SSc中PAH发生的可能性。

技术领域

本发明属于生物检测领域，具体涉及系统性硬化症诊断及PAH预测的生物标志物及其用途。

背景技术

系统性硬化症(Systemic sclerosis,SSc)，也被称为硬皮病(scleroderma)，是一种以局限性或弥漫性皮肤增厚和纤维化为主要特征的系统性自身免疫病。本病的主要特点为固有免疫和适应性免疫功能异常以及微血管损伤，最后导致细胞外基质和胶原的过度产生和堆积。尽管临床上通常以进行性的皮肤增厚变硬及纤维化为最主要特征，但除皮肤受累外，纤维化病变还可累及多个内脏器官(肺、心脏、肾脏和消化道等)，并且这些改变才是临床预后的决定性因素。其中肺间质病变(Interstitial lung Disease，ILD)和肺动脉高压(pulmonary hypertension，PAH)不仅是最严重且预后最差的并发症，也是患者主要的死亡原因。最新的流行病学数据显示，SSc患者中约50％会出现ILD，约15％会出现PAH。其他并发症状还包括食管功能障碍，肾危象，指端溃疡，甲褶微循环异常以及皮肤病理显示真皮层胶原纤维增多融合等。此外，SSc作为一种自身免疫性疾病，往往伴随自身抗体的产生，其中具有诊断意义最重要的自身抗体包括抗拓扑异构酶I抗体(Anti–topoisomerase I)，也称为抗Scl-70抗体，抗着丝点抗体(Anticentromere，ACA)和抗RNA聚合酶III抗体(Anti–RNApolymerase III)。

目前研究认为SSc是在具有遗传易感性的患者中由环境因素导致发病的，并且是由一种由免疫细胞和细胞因子介导的慢性级联放大的多灶性过程所触发，这一过程主要以血管改变、炎症、自身免疫过程以及纤维化为主要特征。例如，血管内皮细胞在受到外界刺激或异常激活之后，其细胞表面的内皮素和多种受体结合引起转化生长因子β(transforming growth factorβ，TGF-β)介导的和II型骨形态发生蛋白受体(Bonemorphogenetic protein receptor type II，BMPR2)介导的Smad信号通路转导异常，既而影响B细胞自身抗体的分泌和T细胞的分化；T细胞异常分化，白细胞介素(Interleukin，IL)IL-1、IL-6、TGF-β等细胞因子水平的改变导致调节性T细胞(Regulatorycells，Tregs)Treg/Th17细胞调节失衡，使其下游的核因子-κB(Nuclear factor-κB，NF-κB)等促进炎症效应的信号通路效应削弱；TGF-β信号通路的异常调节可打破其促进炎症和促进纤维化的双重效应之间的平衡，通过结缔组织生长因子(connective tissue growthfactor，CTGF)向下游传递促使成纤维细胞向肌纤维母细胞转分化的信号，从而导致细胞外基质的大量产生和胶原堆积。SSc的更进一步发病机制目前仍未明确，需要不断的深入研究来补充目前所发现的可能途径。