[发明专利]一种弧菌H11及其应用

说明书

本发明涉及一种弧菌H11及其应用，保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：M 2018172。本发明筛选到一株高效水解浒苔多糖的菌株，且它水解获得的还原糖能够被能源菌株利用生成生物能源物质，与现有的水解浒苔多糖的单一菌株相比较，本发明中的弧菌H11的水解能力最强。本发明通过弧菌的水解与梭菌的厌氧发酵相结合，从而实现浒苔的高值化利用。

技术领域

本发明微生物生物技术和资源生物技术领域，尤其涉及一种弧菌H11及其应用。

背景技术

浒苔(Enteromorpha)是一种大型绿藻，属于绿藻门(Chlorophyta)石莼目(Ulvales)石莼科(Ulvaceae)的植物。近年来由于全球变暖、海水富营养化，导致浒苔迅速生长，对海洋生态环境带来了极大的影响。早期对浒苔的填埋和焚烧，对周围的水体和土壤造成了严重污染，且造成了生物质资源的浪费。如何有效利用浒苔这一爆发性资源，已成为改善海洋生态环境和海藻综合利用的研究热点。

浒苔作为一种大型绿藻是一种潜在的可再生的生物燃料源，可用于制取生物油、沼气或乙醇等。然而由于浒苔多糖成份复杂且尚不清楚，导致研究者们对于浒苔的高值化利用的研究还比较少，对浒苔及浒苔多糖在活性寡糖或生物能源方面在应用还是很少。目前，对浒苔的处理方法主要有水热法、快速热解法和发酵法。但水热法和快速热解法获得的燃油很难被直接被利用；所以，微生物酶法受到广大研究者的青睐。在当前用于微生物产醇类、酸类的主要碳源为葡萄糖、木糖、果糖等单糖类，其成本太高。但浒苔这一爆发性资源可被水解成可发酵还原糖，作为一种新型的产生物能源在原料。

发明内容

本发明的目的在于提供一种弧菌H11及其应用，以解决目前浒苔多糖成份复杂且尚不清楚，导致研究者们对于浒苔的高值化利用的研究还比较少，所以研究浒苔利用的方案比较单一，目前主要是物理化学的方法，其方法具有很大的局限性等问题。

为解决上述问题，本发明提供了一种弧菌H11(Vibrio sp.H11)，于2018年3 月31日保藏于“中国典型培养物保藏中心”，其保藏编号为：CCTCC NO：M 2018172，保藏单位地址为：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学保藏中心。该发明菌株能以浒苔多糖为唯一碳源的培养基中生长，且其为革兰氏染色阴性菌；生理生化特征具有VP阳性，MR阳性，明胶液化阴性。能以“绿潮”浒苔生物质作为唯一碳源和能源生长并水解成梭菌可发酵的还原糖，用于厌氧发酵生成生物氢气和生物有机溶剂等。

上述弧菌H11的培养方法为：将所述弧菌H11菌接种到浒苔多糖为唯一碳源生长，培养基组成为(1L)(NH₄)₂SO₄，1.0g；Na₂HPO₄，0.8g；KH₂PO₄， 0.2g；MgSO₄·7H₂O，0.2g；CaCl₂·2H₂O，0.1g；FeCl₃·6H₂O，5mg； (NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O，1mg；ddH₂O 1L；浒苔多糖，20g；胰蛋白胨，5g/L中，在温度为30℃，pH为8.71培养12h。培养基先在121℃灭菌20min。

弧菌H11的应用，可用于水解“绿潮”生物质。主要用于将浒苔水解为成梭菌可发酵的还原糖。弧菌H11将浒苔中的浒苔多糖水解为还原糖后梭菌的厌氧发酵转化为生物能源物质。应用方法主要包括：在含有浒苔粉末或浒苔多糖的厌氧发酵培养基中加入含有所述弧菌H11的浓缩的粗酶液，并40℃、200rpm 摇床中水解48h。再接种梭菌厌氧发酵。梭菌可以为Clostridium acetobutylicum WA菌株。