[发明专利]一种猪瘟脾淋弱毒疫苗的生产方法有效
申请号: | 201810559145.3 | 申请日: | 2018-06-01 |
公开(公告)号: | CN108619504B | 公开(公告)日: | 2022-02-01 |
发明(设计)人: | 刘幼英;池宗棋;刘小龙;陈建;范江钢;瞿晓斌 | 申请(专利权)人: | 派生特(福州)生物科技有限公司 |
主分类号: | A61K39/12 | 分类号: | A61K39/12;A61P31/14 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 刘奇 |
地址: | 350000 福建省*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 猪瘟 脾淋弱毒 疫苗 生产 方法 | ||
1.一种猪瘟脾淋弱毒疫苗的生产方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将实时体温检测仪安装在无特定病原微生物感染原料兔的颈部,将所述实时体温检测仪连接至抗原收获智能判定系统中,根据所述抗原收获智能判定系统中设置原料兔的筛选参数进行筛选,得到合格的原料兔;
所述原料兔的筛选参数包括以下内容:大兔编号1-10000、大兔温度设定范围:38.2~39.5℃;每隔10min观察一次,体温波动范围值为±0.5℃;符合设定参数范围的大兔为合格,超过或低于所设温度范围则为不合格;
(2)将猪瘟兔化弱毒株液接种于所述合格的原料兔中,得到接毒的原料兔;
(3)将所述脾淋苗智能监测系统实时收集的所述接毒的原料兔的体温数据传输至脾淋苗智能监测系统中,根据所述抗原收获智能判定系统中设定的接种后参数确定收获时间,处死原料兔,取免疫组织制备生产用毒种;
所述接种后参数设定:第一阶段潜伏期温度范围设定38.2~39.7℃,潜伏期时间段设定:接种时至接种后24h;第二阶段潜伏期时间设定:接种后第24h至48h,第二阶段潜伏期接种大兔体温最低值设定:超过第一阶段潜伏时最高温1℃以上,观察时间设定:每隔10min,连续温次次数设定:≥108次;第二阶段稽留期维持时间设定:18h~36h,降至常温波动值设定:38.2~42.0℃;符合设定参数范围的大兔为合格,超过或低于所设温度范围则为不合格;合格兔收苗时间设定:连续50个温次≤前一次温度;
(4)将实时体温检测仪安装在新一批无特定病原微生物感染的原料兔的颈部,将所述实时体温检测仪连接至抗原收获智能判定系统,根据所述抗原收获智能判定系统中设置生产兔的隔离观察参数筛选,得到合格的生产兔;所述大兔隔离观察参数设定:大兔编号1~10000、隔离观察温度38.2~39.7℃,观察时间设定:每隔10min一次,体温波动范围值为±0.5℃;符合设定参数范围的大兔为合格,超过或低于所设温度范围则为不合格;
(5)将所述步骤(3)中的生产用毒种接种于所述合格的生产兔中,根据抗原收获智能判定系统中设定的接种后参数确定收获时间,处死生产兔,取免疫组织破碎,过滤,得到猪瘟脾淋弱毒疫苗;
所述接种后参数设定同步骤(3)中的设定参数;
所述步骤1)~3)与步骤4)之间没有时间顺序的限制;
所述实时体温检测仪连接至抗原收获智能判定系统的方法是将体温实时测定仪连接至集中器,所述集中器与服务器连接,所述服务器与所述抗原收获智能判定系统连接;所述实时体温检测仪采集的兔体温数据实时输送至服务器,所述服务器对根据所述兔体温数据作时间-体温曲线,并将所述时间-体温曲线传输给抗原收获智能判定系统;所述步骤(2)中猪瘟兔化弱毒株液的抗原浓度为0.02~0.05g/ml;所述步骤(2)中猪瘟兔化弱毒株液的接种体积为1ml/只兔。
2.根据权利要求1所述生产方法,其特征在于,所述步骤(3)中免疫组织包括脾脏。
3.根据权利要求2所述生产方法,其特征在于,所述步骤(3)中免疫组织制备生产用毒种的方法包括以下步骤:将冻干的免疫组织在无菌条件下研磨,将研磨后的免疫组织粉末用生理盐水稀释,得到生产用毒种;
所述研磨后的免疫组织粉末的质量和生理盐水的体积比1g:10~20ml的量稀释。
4.根据权利要求1所述生产方法,其特征在于,所述步骤(5)中免疫组织包括脾脏。
5.根据权利要求4所述生产方法,其特征在于,所述免疫组织破碎,过滤的方法如下:将所述免疫组织在保护剂作用下破碎,逐层过滤,得到猪瘟脾淋弱毒疫苗。
6.根据权利要求5所述生产方法,其特征在于,所述免疫组织的质量和保护剂的体积比为1g:10~24ml;所述保护剂为含质量浓度5%蔗糖的牛奶。
7.根据权利要求1~6任意一项所述生产方法,其特征在于,所述步骤(3)中生产用毒种按照《中华人民共和国兽用生物制品规程》的要求进行检测;所述步骤(5)中猪瘟脾淋弱毒疫苗按照《中华人民共和国兽用生物制品规程》的要求进行检测。
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