[发明专利]一种基于噬菌体展示技术定位的加工破坏的β-伴大豆球蛋白α’亚基抗原区域及筛选方法

说明书

本发明公开了一种基于噬菌体展示技术定位的加工破坏β‑伴大豆球蛋白α’亚基的抗原区域及其筛选方法，所述抗原区域的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示。本发明利用一系列生物信息学软件并参照PDB数据库已解析的β‑伴大豆球蛋白三维晶体结构，以噬菌体展示技术研究加工破坏β‑伴大豆球蛋白的抗原区域，通过在噬菌体表面呈现β‑伴大豆球蛋白α’亚基全长及其overlapping分段蛋白，对不同加工方法导致β‑伴大豆球蛋白α’亚基抗原性降低的区域进行精确定位。为食品工业提供加工方法筛选的理论依据，也可以进一步发展出快速检测加工食品脱敏效果的应用产品。

技术领域

本发明涉及分子生物学、免疫学、生物信息学领域，特别是涉及一种基于噬菌体展示技术定位的加工破坏β-伴大豆球蛋白α’亚基的抗原区域。

背景技术

过敏反应也被叫做变态或者超敏反应，为人类自身免疫疾病中常见的一种反应。在所有的过敏性疾病中，食物过敏占到50％。大豆为8类主要食物过敏源之一。早在公元前2000年就存在的大豆及其大豆制品长出现在亚洲饮食中，且将这种富含蛋白质、油脂和其他功能性物质的大豆当做很好的营养物质的来源。而拉丁美洲、非洲和印度也同样将比较常见的大豆作为基本食物之一。根据调查研究表明，在普通人群中大豆致敏率约为0.5％，而在儿童中则高达13％左右，大豆过敏会使人出现急性哮喘、颤抖、恶心、呕吐甚至休克、死亡。大豆不仅能够引起人出现过敏反应，还能够导致猪、牛、老鼠、鲑鱼等动物出现过敏反应。

与大多数植物过敏原一样，大豆中引起食物过敏反应的主要过敏原大多为蛋白质，主要的致敏蛋白主要有：大豆球蛋白(Glycinin，11S)、β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin，7S)、Gly m Bd 28K(7S)以及Gly m Bd 30K(P34，7S)。β-伴大豆球蛋白是由α’(58～83kDa)、α(58～77kDa)和β(42～53kDa)三种亚基组成的三聚体复合物，其含量分别为45％、35％和20％。β-伴大豆球蛋白的三个亚基均存在过敏原性，亚基α、α’、β之间存在基因序列的相似，其中亚基α和亚基α’的相似性最高，约为86.8％，其次为亚基α和β的相似性，约为75.5％，亚基α’和β的相似度约为71.4％，相似性最低。α、α’、β亚基中含有丰富的精氨酸、亮氨酸、谷氨酸(酰胺)和天冬氨酸(酰胺)，然而蛋氨酸的含量较低，并且三个亚基中含有的蛋氨酸残基的个数也不尽相同，α’亚基中的蛋氨酸残基为3-4个，α亚基中有2个，β亚基中则不含蛋氨酸残基。α、α’、β亚基中都含有N-，其中β亚基中含有一个，α和α’中各含有两个。β-伴大豆球蛋白α’亚基含有2042个碱基，ORF阅读框中含有621个氨基酸，除去信号肽部分含有597个氨基酸。