[发明专利]一种基于低免疫原性胶原蛋白修饰的高生物活性普鲁兰医用薄膜及其制备方法

权利要求书

1.一种基于低免疫原性胶原蛋白修饰的高生物活性普鲁兰医用薄膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将低免疫原性胶原蛋白溶液与氧化普鲁兰相混合，控制低免疫原性胶原蛋白用量为氧化普鲁兰质量的50%~150%，22～40℃下充分反应；至清澈透明后，加入交联剂进行二次交联；取充分反应的溶液制膜，得到基于低免疫原性胶原蛋白修饰的高生物活性普鲁兰医用薄膜。

2.如权利要求1所述的一种基于低免疫原性胶原蛋白修饰的高生物活性普鲁兰医用薄膜的制备方法，其特征在于，所述氧化普鲁兰由包括以下步骤的方法制得：

取1质量份普鲁兰加入到50～200体积pH为7.4的磷酸缓冲液中，22~80℃下搅拌至溶液完全澄清，配制成1份普鲁兰水溶液；以及，

将0.5～1.5质量份高碘酸钠同样溶解到50～100体积pH为7.4的磷酸缓冲液中，室温下搅拌至完全溶解，配制成1份高碘酸钠溶液；以及，

将0.5～1.5份高碘酸钠溶液缓慢加入到1份普鲁兰溶液中，4～10℃下避光搅拌反应48～96h，待反应结束后，加入4～20体积聚乙二醇终止反应，室温下搅拌30min后，使用截留量为300～500Da的透析袋在去离子水中透析3～5天，最后冷冻干燥制备得到氧化普鲁兰；

上述步骤中，质量与体积的对应关系为1质量份：1体积=1g：1ml。

3.如权利要求1所述的一种基于低免疫原性胶原蛋白修饰的高生物活性普鲁兰医用薄膜的制备方法，其特征在于：所述交联剂为MES、EDC、与NHS的组合或戊二醛中的一种或多种。

4.如权利要求1所述的一种基于低免疫原性胶原蛋白修饰的高生物活性普鲁兰医用薄膜的制备方法，其特征在于，具体步骤包括：

1）将0.5～3.0质量份的氧化普鲁兰溶解到50～300体积pH为7.4的磷酸缓冲液或蒸馏水中，50℃~80℃室温下搅拌至完全溶解，配制成1份氧化普鲁兰溶液；

2）将低免疫原性胶原蛋白与氧化普鲁兰按质量比0.5:1~1.5:1，将低免疫原性胶原蛋白加入到1份氧化普鲁兰溶液中，22~40℃下磁力搅拌反应0.5~24h，搅拌至清澈透明；冷却至室温后，加入0.5~6体积的MES乙醇水溶液，搅拌均匀；加入EDC和NHS，使得EDC的添加量为0.5~2质量份、并使EDC与NHS摩尔比为1:2.5，反应24~48小时；移取基于低免疫原性胶原蛋白修饰的高生物活性普鲁兰混合溶液均匀铺展在聚四氟乙烯板中，置于烘箱中，于20~40℃干燥24~72h，制备得到基于低免疫原性胶原蛋白修饰的高生物活性普鲁兰医用薄膜；

上述步骤中，质量与体积的对应关系为1质量份：1体积=1g：1ml。

5.如权利要求1所述的一种基于低免疫原性胶原蛋白修饰的高生物活性普鲁兰医用薄膜的制备方法，其特征在于，具体步骤包括：

1）将0.5～3.0质量份的氧化普鲁兰溶解到50～300体积pH为7.4的磷酸缓冲液或蒸馏水中，50℃~80℃室温下搅拌至完全溶解，配制成1份氧化普鲁兰溶液；

2）将低免疫原性胶原蛋白与氧化普鲁兰按质量比0.5:1~1.5:1，将低免疫原性胶原蛋白加入到1份氧化普鲁兰溶液中，22~40℃下磁力搅拌反应0.5~24h，搅拌至清澈透明；冷却至室温后，加入0.5~2质量份戊二醛；移取基于低免疫原性胶原蛋白修饰的高生物活性普鲁兰混合溶液均匀铺展在聚四氟乙烯板中，置于烘箱中，于20~40℃干燥24~72h，制备得到基于低免疫原性胶原蛋白修饰的高生物活性普鲁兰医用薄膜；

上述步骤中，质量与体积的对应关系为1质量份：1体积=1g：1ml。

6.如权利要求1所述的一种基于低免疫原性胶原蛋白修饰的高生物活性普鲁兰医用薄膜的制备方法，其特征在于，所述的氧化普鲁兰的氧化度为35%～50%。

7.权利要求1~6任一项所述方法制备的基于低免疫原性胶原蛋白修饰的高生物活性普鲁兰医用薄膜。