[发明专利]一种高粱中角鲨烯含量的测定方法

说明书

本发明公开了一种测定高粱中角鲨烯含量的方法，通过粉碎、浸提、萃取，建立了液液微萃取结合气相色谱‑质谱联用技术(GC‑MS)测定高粱中角鲨烯含量的方法。本方法采用NaOH‑乙醇‑水溶液浸提，能够减小高粱中油脂的干扰，大幅提高目标物的响应，具有灵敏、快速、准确的优点，从而实现了高粱中角鲨烯含量的准确测定。

技术领域

本发明属于分析化学研究领域，具体涉及一种高粱中角鲨烯含量的测定方法。

背景技术

角鲨烯是一种具有生物活性的萜类物质，具有提高体内超氧化物歧化酶(SOD)活性、增强机体免疫能力、抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤等多种生理功能。近年来的研究指出通过膳食补充的角鲨烯同样具有健康功效，同时通过膳食补充角鲨烯的护肤作用也被逐渐证实。

角鲨烯除在鲨鱼肝脏中含量较高外，在橄榄油、米糠油等植物油中含量也相对较高，虽然有研究报道了采用索氏提取法对大米中的角鲨烯含量进行测定，但高粱中的角鲨烯含量低，油脂含量高(3～5％)，目前尚未有高粱中角鲨烯的研究。固体样品中角鲨烯含量的测定一般采用索氏提取法富集脂溶性成分后进行分析，对于脂肪含量高的样品如植物油等，则需要进一步采用皂化反应消除脂肪酸等的干扰，以提高角鲨烯的仪器响应。这些方法的有机溶剂用量大、反应时间长、操作繁琐，检测成本高。

发明内容

为了解决现有技术存在的上述问题，本发明提出一种高粱中角鲨烯含量的测定方法。

本发明的目的在于提供一种简便、有机溶剂用量小、成本低的高粱中角鲨烯含量的测定方法。

本发明采用乙醇水溶液浸提并加入适量NaOH，利用角鲨烯醇溶性和非皂化的特性，通过液液微萃取使角鲨烯在有机相中得到富集，减小了高粱中油脂的干扰，提高了高粱中角鲨烯的检出限和准确性。同时，操作步骤简便、大大减少了有机溶剂的使用量，节省了前处理时间。

具体是通过以下技术方案实现的：

本发明提供了一种测定高粱中角鲨烯含量的方法，是将高粱籽粒经粉碎、浸泡、离心、萃取处理获得有机相，采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析，具体包括以下步骤：

(1)粉碎：

作为优选的实施方式，高粱籽粒除杂后，采用旋风粉碎机进行磨碎。

(2)浸提：

采用NaOH乙醇水溶液作为浸提液浸提粉碎后的样品，离心获得上清液备用。

步骤(2)中，所述的浸提液为NaOH乙醇水溶液。在所述的NaOH乙醇水溶液的中，NaOH的浓度为0～0.3mol/L；乙醇的体积分数为0～40％。作为优选的实施方式，NaOH的浓度为0.1～0.25mol/L；乙醇的体积分数为10～20％；作为更优选的实施方式，NaOH的浓度为0.15mol/L；乙醇的体积分数为10％。粉碎样品与浸提液(NaOH乙醇水溶液)的质量：体积比为1:(5～30)；优选为1：20。作为优选的实施方式，采用振荡的方式进行浸提。进一步地，浸提时间为5～30min，振荡的转数为150～450r/min；优选浸提时间为15min；振荡的转数为450r/min。其中，离心转数为3000～6000r/min，时间为5～30min；作为优选的实施方式，离心转数为4500r/min，时间为5min。

(3)萃取：

将NaCl、上清液和萃取剂混匀，静置分层后获得上层有机相待分析。

步骤(3)中，所述的萃取剂为戊烷、正己烷或乙醚中的至少一种。作为优选的实施方式，所述的萃取剂为乙醚和戊烷的混合物；更优选地，乙醚和戊烷的体积比为1:1。作为优选的实施方式，步骤(3)中，采用旋涡振荡的方式混匀；进一步地，振荡时间为1～5min；更优选为1min。萃取剂与上清液的体积比为1:(1～10)；优选为1:5。NaCl与上清液的质量体积比为(1～5):1；优选为3.6：1。