[发明专利]枯草芽胞杆菌、其制剂及其应用

说明书

本发明提供了一种枯草芽胞杆菌，其保藏编号为CGMCC No.8925。本发明还提供了一种枯草芽胞杆菌制剂及其应用。本发明提供的枯草芽胞杆菌制剂活菌含量高，活菌含量(芽胞)达2.0×10¹¹cfu/g，保质期长，对小麦全蚀病、根腐病和纹枯病均有显著防治效果，大田试验对小麦全蚀病的防治效果达68％以上，对小麦根腐病的防治效果达72％以上，对小麦纹枯病的防治效果达70％以上。

技术领域

本发明属于枯草芽胞杆菌技术领域，尤其涉及一种枯草芽胞杆菌、其制剂及其应用。

背景技术

小麦作为世界上分布最广的三大粮食作物之一，产量和种植面积居于栽培谷物的首位，我国每年种植小麦的面积约3000万公顷。小麦在我国的种植历史悠久，迄今已有5000多年历史，其中河南、河北、山东、湖北、江苏、安徽等省是我国小麦的主要产区。近年来，小麦的生产受到许多真菌病害的影响，特别是小麦根茎部的真菌病害，近些年有进一步扩大发展的趋势，对小麦的产量和品质造成了很大的危害。

小麦根茎部主要真菌病害包括小麦根腐病、小麦纹枯病和小麦全蚀病，这三种主要病害都属于土传真菌病害，并且发生在小麦的各个生长时期。这些病害的发生均能造成小麦的严重减产，而且这些病害经常混合发生，在小麦苗期引起的症状也不太容易区分，这就造成了早期防治的困难。研究表明，引起小麦纹枯病的病原菌主要是禾谷丝核菌(Rhizotonia cerealis)，引起小麦根腐病的病原菌主要为禾旋孢腔菌(Cochliobolussativus)，引起小麦全蚀病的病原菌为禾顶囊壳小麦变种(Gaeumannomyces graminisvar.tritici)。

生物防治绿色环保，病原菌不易产生耐药性。芽胞杆菌(Bacillus spp.)在自然界中广泛存在，为非致病细菌，对人畜无毒无害；在植物根际土壤及植株体内有效定殖，对多种植物病原菌有广谱拮抗活性；调节土壤微环境，促进作物生长。芽胞杆菌突出的特征是能够产生抗逆耐热的芽胞，有利于菌种筛选、菌剂制备、在环境中存活定殖，田间防效显著，较非芽胞杆菌和真菌生防菌性能优良。芽胞杆菌生防制剂生产工艺较简单，应用前景广阔。

目前小麦根部真菌病害生防菌剂的开发应用尚属薄弱环节，拮抗菌剂的类型、品种、功能、质量等方面与实际生产需要还存在一定差距，如菌种不适于大规模生产或生产成本高，价格昂贵；产品稳定性差、保质期短，不利于储藏和运输；产品活菌含量低，作用效果不显著等；产品功能单一，实际生产应用困难。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供枯草芽胞杆菌、其制剂及其应用，本发明提供的枯草芽胞杆菌制剂活菌含量高，保质期长，对小麦全蚀病、小麦根腐病和小麦纹枯病均有显著防治效果。

本发明提供了一种枯草芽胞杆菌，其保藏编号为CGMCC No.8925。

本发明提供的枯草芽胞杆菌菌落圆形，边缘整齐，表面不光滑有皱褶，不产生色素；革兰氏阳性，菌体杆状，芽胞呈椭圆形中生；菌株呈氧化酶阳性；可利用葡萄糖、甘露醇、乳糖，不利用葡萄糖产气；V-P反应、明胶液化、酪素水解及淀粉水解反应阳性，脲酶酶反应阴性；可耐受10％NaCl，硝酸盐还原反应阳性。将拮抗细菌Z-5菌株菌体形态、菌落特征及生理生化试验结果与《伯杰氏细菌鉴定手册》进行对照，初步鉴定Z-5菌株为Bacillus spp.。

利用通用引物27f/1495r扩增其16S rDNA，PCR产物测序结果在NCBI数据库中用Blast进行分析，与模式菌株进行同源性比较，用MEGA5.0软件构建系统发育树。结果表明，其与Bacillus subtilis NRRLB23049同处于一个分支。根据16S rDNA序列相似性分析，确定其属于枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)。

本发明还提供了一种枯草芽胞杆菌制剂，由上述技术方案所述的枯草芽胞杆菌经发酵、离心、喷雾干燥获得。

在一个实施例中，所述枯草芽胞杆菌固体制剂中活菌含量＞1.5×10¹¹cfu/g。