[发明专利]喷雾干燥制备植物乳杆菌ZJ316细菌素的方法

说明书

本发明公开了喷雾干燥制备植物乳杆菌ZJ316细菌素的方法。该方法包括以下步骤：（1）发酵：将植物乳杆菌ZJ316进行活化并发酵培养，得到发酵液；（2）分离：将发酵液通过膜分离系统进行过滤，收集上清液；（3）收集：向上清液中加入辅料；混合后通过喷雾干燥法进行收集，得到细菌素。该种方法通过大大提高细菌素的收率和活力，同时也使提高了细菌素的纯度，并且由液态形式变成固态形式，便于储存和运输，因为液态存在对细菌素不稳定因素，变成固态后也有效的保护了细菌素的生物特性。不仅避免了传统收集方法的高成本的缺点，而且也有效的提高了细菌素的收率。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及喷雾干燥制备植物乳杆菌ZJ316细菌素的方法。

背景技术

细菌素是由乳杆菌产生的一种耐高温、耐酸、在人体中可降解、安全无毒，且具有较强抑菌活性的抗菌短肽。细菌素是由微生物通过核糖体合成机制产生的一类具有抗菌活性的蛋白质或低分子量多肽物质，抑菌范围不仅仅局限于同源的细菌，产生菌对其细菌素具有自身免疫性。

细菌素作为一种特殊的抗菌抑菌蛋白质，具有抑菌活性强、生物相容性好、性能稳定、可生物降解、可消化吸收、生物安全性高的特点，在预防及治疗畜禽疾病、生产绿色生物添加剂和生物兽药领域具有广阔的开发应用前景。

目前已发现多株产细菌素的乳酸菌，这些乳酸菌的分子量从几千到几万道尔顿不等，如lactocin 27 分子量为12400Da，lactacin B 分子量为6300Da，plantaricin AMA-K分子量为2900Da 等，这些细菌素的共同点是，细菌素是一种小分子多肽，具有蛋白质的一些基本特性。细菌素的本质是多肽或蛋白质。在细菌素的保存中，为了避免其活性的降低，实验室多采用冷冻干燥的方法，但是这一方法成本高，处理量少，运输困难，并不适合工业化大规模制备细菌素。根据不同的细菌素的特点，细菌素的纯化方法也存在差异，且目前公开的传统方法纯化效果、收率和活力均不是很理想。

发明内容

本发明的目的在于，针对上述现有技术的不足，提出喷雾干燥制备植物乳杆菌ZJ316细菌素的方法，该种方法通过喷雾干燥法制备具有高收率和高活力的细菌素。

本发明提出喷雾干燥制备植物乳杆菌ZJ316细菌素的方法，包括以下步骤：

（1）发酵：将植物乳杆菌ZJ316进行活化并发酵培养，得到发酵液；

（2）分离：将所述发酵液通过膜分离系统进行过滤，过滤后收集上清液；

（3）收集：向所述上清液中加入辅料；混合后通过喷雾干燥法进行收集，得到细菌素。

本发明采用膜分离系统进行分离纯化，不仅可以在常温下进行，而且大大降低了有效成分的损失，特别适用于细菌素的分离；典型的物理分离过程，不用化学试剂和添加剂，产品不受污染，产品活性不受化学试剂和添加剂的影响；在过滤过程中不会带入杂质，有助于后序收集，保证了收率。

喷雾干燥法是系统化技术应用于物料干燥的一种方法。于干燥室中将稀料经雾化后，在与热空气的接触中，水分迅速汽化，即得到干燥产品。该法能直接使溶液、乳浊液干燥成粉状或颗粒状制品，可省去蒸发、粉碎等工序。干燥过程非常迅速。可直接干燥成粉末。易改变干燥条件，调整产品质量标准。由于瞬间蒸发，设备材料选择要求不严格。

干燥室有一定负压，保证了制备过程中的卫生条件，避免粉尘飞扬，提高产品纯度。生产效率高，操作人员少。生产能力大，产品质量高。每小时喷雾量较大，是干燥器处理量较大者之一。

采用喷雾干燥法进行收集其目的是提高处理量，使产品具有更高的收率、更好的活力。由于只添加了已知辅料，而且辅料对细菌素活力具有一定的保护作用，在收集过程中避免了其他杂质的混入，不仅保证了产品的纯度，而且也大大的提高了产品的收率，同时因所喷出的物料只是在喷成雾状颗粒时才受到高温，故只是瞬间受热，能保持这些活性材料在干燥后仍维持其活性成份不受破坏，提高了产品活力。