[发明专利]一种乳酸杆菌产γ-氨基丁酸的培养基及其制剂和应用

说明书

本发明公开了一种乳酸杆菌产γ‑氨基丁酸的培养基及其制剂和应用，该培养基按照质量分数包括以下组分：葡萄糖2％、酵母浸粉和米糠混合物3％、L‑谷氨酸1.5％，吐温‑80 0.1％，七水硫酸镁0.02％，四水硫酸锰0.005％，余量为蒸馏水。含γ‑氨基丁酸的微生物制剂通过平板培养、摇瓶种子液制作、驯化培养和发酵培养制备得到，该制剂应用于养殖技术中具有提高免疫，调节肠道菌群的作用，同时具有γ‑氨基丁酸镇静抗压的作用。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种乳酸杆菌产γ-氨基丁酸的培养基及其制剂和应用。

背景技术

在畜牧业中，不同时期的动物会由于种种原因表现出亢奋、神经质、食欲不振等生理状态，这对于动物以及群体，特别是刚出生以及处于孕期的动物，都是不利的。目前抗应激反应多采用肌肉注射安痛定、地塞米松磷酸钠、抗菌素等药物，存在对动物有毒害和残留的副作用。γ-氨基丁酸是具有较高活性的天然存在的非蛋白质氨基酸，作为一种神经递质，可以发挥镇静、安神等生物学功能，起到缓解动物亢奋、神经质的生理状态，且对动物本身没有明显的副作用。

γ-氨基丁酸广泛分布在动植物体内，但由于γ-氨基丁酸以结合态存在植物体内，增加了提取的难度，很难利用富集法获得高浓度γ-氨基丁酸。目前获得γ-氨基丁酸的方法主要是化学合成法和生物合成法，化学合成过程中添加了多种有毒、腐蚀性化学试剂，反应条件苛刻，难提取食品级γ-氨基丁酸。而生物合成基本不添加化学试剂，无污染，只需要保证微生物代谢产物处在安全范围之内，这将成为未来制备γ-氨基丁酸的大方向。微生物发酵法主要是利用菌株自身的酶系统来催化γ-氨基丁酸的合成。其中谷氨酸脱羧酶是调控γ-氨基丁酸合成的主要酶。但是目前普遍存在谷氨酸脱羧酶活力不高和菌种潜在不安全性问题，因此寻找高活力谷氨酸脱羧酶的安全性菌种生产γ-氨基丁酸，仍需要微生物研究者不断的努力。

乳酸菌具有较多的OH自由基清除能力，是国际上通常认为安全的微生物，是人和动物体内不可少的重要生理菌群，与人和动物的生命活动紧密相关，长期以来广泛用于食品加工。由于一些乳酸菌也能产生γ-氨基丁酸，因而利用乳酸菌生产γ-氨基丁酸已成为一个安全和理想的途径。但是常规生产γ-氨基丁酸添加剂没有保留活的乳酸菌，本发明出发点是研究一种微生物制剂，而该微生物制剂包含产γ-氨基丁酸的乳酸菌，使其具有乳酸菌促生长，提高免疫，调节肠道菌群的同时具有γ-氨基丁酸镇静抗压的作用。

发明内容

针对现有技术存在的技术缺陷，本发明目的在于提供一种乳酸杆菌产γ-氨基丁酸的培养基及其制剂和应用。

本发明具体通过以下技术方案实现：

一种乳酸杆菌产γ-氨基丁酸的培养基，按照质量分数包括以下组分：葡萄糖2％、酵母浸粉和米糠混合物3％、L-谷氨酸1.5％，吐温-80 0.1％，七水硫酸镁0.02％，四水硫酸锰0.005％，余量为蒸馏水。

优选的，一种乳酸杆菌产γ-氨基丁酸的培养基，按照质量分数包括以下组分：葡萄糖2％、酵母浸粉和米糠混合物3％、L-谷氨酸1.5％，吐温-80 0.1％，七水硫酸镁0.02％，四水硫酸锰0.005％，余量为蒸馏水。

所述的酵母浸粉与米糠按照质量比1:1混合。

本发明所述的乳酸杆菌为短乳杆菌(Lactobacillus brevis)P-14菌株，保藏编号为CGMCC NO.9029，2014年4月9日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

本发明还提供了一种含γ-氨基丁酸的微生物制剂的制备方法，包括以下步骤：

1)平板培养：采用划线接种法将短乳杆菌P-14接种于固体活化培养基平板上，于30℃～37℃培养36～48h，复苏短乳杆菌P-14形成单菌落；