[发明专利]一种莲藕脱毒组织培养方法

说明书

本发明公开了一种莲藕脱毒组织培养方法，包括如下步骤：（1）选材：选取无腐无病害、健壮莲藕块茎；（2）催芽：将选取好的莲藕块茎进行催芽；（3）表面处理；（4）切割；（5）初代培养；（6）增殖继代；（7）生根；（8）驯化炼苗：将根系发达的莲藕无菌小苗采用半干半湿苔藓包住根部，放于苗钵中，转移至小温棚中进行驯化。本发明的有益效果是：本发明对影响莲藕组培苗快繁的培养基、培养温度和光照时间及炼苗方法等开展了研究，成功地解决了脱毒、种性退化和提高繁殖系数的问题，提高了产品产量和品质，实现莲藕出口创汇和农民的增收。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体的说涉及一种莲藕脱毒组织培养方法。

背景技术

莲藕是睡莲科多年生水生草本植物，是中国广泛栽培的特色水生蔬菜和重要的出口创汇蔬菜之一。

近年来，我国莲藕的种植面积不断扩大，产品日益畅销于国外市场，但由于莲藕长期以来一直通过根茎进行无性繁殖，其繁殖系数较低，需种量多，成本高，且容易发生种性退化现象，病虫害的发生也有日益严重的趋势，严重影响了产品产量和品质，也限制了生产的进一步扩大，影响了我国的出口创汇和农民的增收。

因此,克服种性退化、改善莲藕品质、提高莲藕的繁殖系数,已成为当前莲藕生产上迫切需要解决的问题。许多无性繁殖的植物已经通过组织培养的方法成功地解决了脱毒、种性退化和提高繁殖系数的问题。对莲藕的组织脱毒技术己有成功的研究报道,但对莲藕组培苗的简易高效快繁技术尚少见报道。目前鲜见莲藕组织培养方法的专利报道，扬州大学谢科硕士毕业论文《莲藕组培苗高效扩繁技术的研究》中初步探讨了莲藕的组织培养方法，但多数研究仅在实验室阶段，不能解决实际生产过程中的问题，具有一定的局限性。

发明内容

本发明的目的是为克服上述莲藕组织培养的缺陷，对莲藕的脱毒组织培养方法进行系统的研究，经过大量实验，得到一种操作简便、提高莲藕产量与品质的培养方法。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

一种莲藕脱毒组织培养方法，包括：

（1）选材：春季或秋季选取无腐无病害、健壮莲藕块茎；

（2）催芽：将选取好的莲藕块茎放置于20~28℃环境中直至得到有苞叶和芽体的莲藕块，春季选取的莲藕块茎如果已经有苞叶和芽体则不需要进行此步骤；

（3）表面处理：对莲藕进行修剪，去掉大的苞叶和杆茎，修剪成一芽一杆的外植体，用自来水对其进行冲洗，滴入洗洁精冲洗15~20min，流水冲洗，直至将洗洁精冲洗干净；将莲藕外植体浸入75%酒精中处理1~5min，随后采用次氯酸钠溶液消毒15~20min，用无菌水冲洗干净；

（4）切割：去掉外侧苞叶，去掉杆茎，保留0.5~1cm外植体；

（5）初代培养：将步骤（4）得到的外植体接种到培养基Ⅰ上，放置于温度25~28℃、每天光照12~20h、光照强度为2500~3500Lux、培养40~60d；

（6） 增殖继代：选取步骤（5）中得到的无菌苗将其接种到培养基Ⅱ上进行增殖培养，培养条件为：温度25~28℃、每天光照10~16h、光照强度为6000~9000Lux、培养25~35d；重复上述增殖过程；

（7）生根：选取长势健壮的莲藕无菌苗，将其接种至培养基Ⅲ中，放置于温度25~28℃、每天光照12~20h、光照强度为7000~9000Lux的环境中，培养20~30d；

（8）驯化炼苗：将步骤（7）得到的根系发达的莲藕无菌苗根部清洗干净，采用半干半湿苔藓包住根部，放置于苗钵中，转移到小温棚中进行驯化，遮荫，保持小温棚中温度为25~28℃，湿度维持在85%以上，此后湿度逐渐减低，直至新叶长出后移植到淤泥中；；