[发明专利]一种碎米荠的组织培养与快速繁殖方法

说明书

本发明公开了一种碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其方法包括以下步骤：A、预处理和外植体的取材与消毒；B、将无菌外植体接种到诱导培养基内，得到愈伤组织；C、丛生芽的诱导；D、将得到的丛生侧芽接种到壮苗培养基内，以得到健壮试管苗；E、生根培养；F、自然驯化；G、组培苗移栽。本发明通过本方法可极大减少碎米荠组织培养过程中后代变异的概率，有利于保持母体的优良形状，采用的植物组织培养便于人为控制培养条件，避免了环境对培养生根率的影响，同时其生产成本低，不污染环境，数量增殖快，能够实现规模化生产。

技术领域

本发明涉及碎米荠培育技术领域，具体为一种碎米荠的组织培养与快速繁殖方法。

背景技术

壶瓶碎米荠是我国特有的野生蔬菜，分布于湖南湖北交界的壶瓶山一带，是世界上目前唯一的纯天然可溶解于水的有机硒，可以和任何食用原料搭配，可加工出富硒食品、富硒饮料，更可以作为保健品的硒元素添加剂，具有强大的市场前景和经济价值，由于野生壶瓶碎米荠产量低，无法满足巨大的社会需求，为此，我们提出一种碎米荠的组织培养与快速繁殖方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种碎米荠的组织培养与快速繁殖方法，其方法包括以下步骤：

A、预处理和外植体的取材与消毒；

B、将无菌外植体接种到诱导培养基内，得到愈伤组织；

C、丛生芽的诱导；

D、将得到的丛生侧芽接种到壮苗培养基内，以得到健壮试管苗；

E、生根培养；

F、自然驯化；

G、组培苗移栽。

优选的，所述步骤A为：取生长状态良好的有分枝的直径约为2mm的壶瓶碎米荠根状茎，置于干净的碟子中晾放至茎尖和茎段稍微变软，用酒精棉轻轻擦拭壶瓶碎米荠根状茎表面的灰尘，再置于无菌玻璃瓶中，在超净工作台上用75％酒精和0.1％二氯化汞消毒，且用75％酒精消毒20～50s，用0.1％二氯化汞消毒20～40min，之后用无菌水冲洗4～5次，最后切成长度约为1cm备用。

优选的，所述步骤B中的诱导培养基由红糖、6-苄氨基腺嘌呤、水解蛋白、琼脂、蔗糖、蒸馏水和激素2,4-D组成，其成分及含量为：红糖12～18g/L、6-苄氨基腺嘌呤2～6mg/L、水解蛋白3～7mg/L、琼脂6～8g/L、蔗糖20～30以及蒸馏水900～950、激素2,4-D 2.4～2.6mg/L。

优选的，所述步骤C为：将愈伤组织放置于培养室，先暗室培养7天后转光照培养，光周期12小时/天，光照度1200～1500lx，室内温度控制在25±2℃内，7天后可见白色芽点转绿，30天后芽体伸长，35天后切下芽体转入增殖培养基得到丛生侧芽。

优选的，所述增殖培养基由6-苄基腺嘌呤、琼脂粉、二水氯化钙、蒸馏水、白糖和ZT组成，其成分及含量为：6-苄基腺嘌呤0.1～0.5mg/l、琼脂粉7～8g/L、二水氯化钙0.45g/L、蒸馏水900～950、白糖20g/L、ZT 0.5～1mg/L。

优选的，所述步骤D中的壮苗培养基由1/2改良MS、CuSO4粉末、吲哚丁酸、活性炭、NiSO4粉末、琼脂和蒸馏水组成，其成分及含量为：1/2改良MS 0.2～0.3mg/L、CuSO4粉末0.75～0.95mg/L、吲哚丁酸1.0～2.0g/L、活性炭100ml/L、NiSO4粉末0.34～0.57mg/L、琼脂20g/L、蒸馏水900～950。

优选的，所述步骤E为：将健壮试管苗从基部切下，插入生根培养基中培养至芽生根，得到生根幼苗。