[发明专利]表面蛋白Rv1468c在消除病原菌方面的应用

说明书

本发明公开了表面蛋白Rv1468c在消除病原菌方面的应用，属于生物医药领域。本发明所述的Rv1468c蛋白通过一个在临床分离的结核分枝杆菌菌株中保守的UBA结构域直接结合人体细胞中的泛素，进而能够促使被感染的人体细胞对分枝杆菌的选择性自噬清除。本发明所述的Rv1468c蛋白及所包含的UBA结构域可成为抗结核分枝杆菌药物的新靶点，并可通过介质递送到病原菌表面为抗感染治疗药物的开发提供指导，同时能够为设计、发展新型抗结核疫苗或相关药品提供参考。

技术领域

本发明涉及表面蛋白Rv1468c在消除病原菌方面的应用，属于生物医药领域。

背景技术

结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)是结核病(Tuberculosis)的病原体。目前，全球有三分之一的人感染结核病，且每年因结核病死亡的人数高达百万。为此，结核病与艾滋病、疟疾并称为当今世界威胁人类健康的三大传染病。

自噬(autophagy)是机体的一种重要的免疫防御机制。包括结核分枝杆菌在内的多种细胞内寄生病原菌侵入宿主细胞后，细胞将激活自噬信号通路，进而将侵入胞内的病原菌表面标记上泛素。随后，自噬受体p62、NDP52、NBR1及OPTN等能够识别并结合到被泛素标记的病原菌上，同时进一步招募和结合自噬体标志物LC3，从而引发自噬体(autophagosome)对细胞质中病原菌的捕获。随后，自噬体将进一步成熟并与溶酶体(lysosome)融合，最终将病原菌降解清除。然而在上述自噬过程中，泛素对病原菌的何种表面蛋白能够进行识别和靶向作用在之前尚无报道。

Rv1468c又称PE_PGRS29，是定位在分枝杆菌细胞表面的一类蛋白，属于分枝杆菌PE_PGRS蛋白家族。分枝杆菌PE_PGRS蛋白家族已鉴定有61个成员，且主要在致病性的分枝杆菌中表达，包括结核分枝杆菌、牛分枝杆菌(Mycobacterium bovis)、海分枝杆菌(Mycobacterium marinum)等。PE_PGRS家族的蛋白大多分布在分枝杆菌表面，因此在分枝杆菌与宿主细胞相互作用中起到了重要作用，且该蛋白家族成员大多都具有不同的调控宿主免疫功能的机制。

发明内容

本发明的第一个目的是提供一种表面蛋白Rv1468c在免疫调节方面的应用。所述表面蛋白Rv1468c蛋白的序列如SEQ ID NO:1所示。该蛋白存在一个可与泛素结合的UBA功能域，该UBA功能域的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过该UBA功能域，Rv1468c受到细胞内泛素的直接靶定和结合，进而引发如前所述的机体细胞对病原菌的选择性自噬信号通路，从而清除侵入细胞内的病原菌。此外，Rv1468c蛋白的第64位和第65位氨基酸组成了UBA功能域中关键的“VL”模序，该模序提供了一个疏水氨基酸簇，帮助Rv1468c蛋白与泛素通过疏水相互作用结合到一起。因此，本发明的Rv1468c蛋白的发现能够促进发展更加高效的抗感染药品或新疫苗，并为靶向宿主提高机体免疫力的治疗方法提供参考。

在本发明的一种实施方式中，所述在免疫调节方面应用包括抑制或清除病原菌。

在本发明的一种实施方式中，所述蛋白Rv1468c含有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。

在本发明的一种实施方式中，所述病原菌具有保守的结合泛素(ubiquitin)的UBA功能域；所述UBA功能域的氨基酸序列包括如以下(a)或(b)或(c)所示：

(a)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；

(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加部分氨基酸且具有结合泛素活性的由(a)衍生的多肽或其类似物；

(c)与(a)、(b)中氨基酸序列整体相似度在85％以上的由(a)衍生的多肽或类似物。

在本发明的一种实施方式中，所述病原菌为分枝杆菌。