[发明专利]一种高效降解自毒物质对羟基苯甲酸的细菌及其应用

说明书

本发明属微生物种质资源的开发与利用技术领域，公开了高效降解自毒物质对羟基苯甲酸的细菌及其应用，该菌株为致金色假单胞菌(Pseudomonas aureofaciens)Z‑H2，能耐受高浓度的对羟基苯甲酸，且能以对羟基苯甲酸为唯一碳源生长，对对羟基苯甲酸有高效降解功能。用紫外分光光度法测定，0.1 mg/ml对羟基苯甲酸条件下培养12小时PA降解了97%。1 mg/ml对羟基苯甲酸条件下培养48小时PA降解了98%。5 mg/ml对羟基苯甲酸条件下，培养72小时PA降解了97%。实验显示该菌株对自毒物质对羟基苯甲酸具有很好的降解效果，对缓解自毒物质引起的连作障碍具有潜在的应用价值。

技术领域

本发明属于微生物种质资源的开发与利用技术领域，具体涉及一种高效降解自毒物质对羟基苯甲酸的细菌及其应用。

背景技术

化感作用( Alle lopathy) 是植物因向环境释放某些化学物质而影响其他植物或自身生长发育的化学生态学现象。已有研究表明，化感作用是造成作物连作障碍的主要因子。通过研究根系化感物质对土壤微生态的影响揭示连作障碍机理是当前研究的热点。

自毒物质是指植物通过地上部淋溶、根系分泌和植株残茬腐解等途径释放并对同茬或下茬同种或同科植物生长产生抑制作用的化学物质。这些物质一方面通过影响离子吸收、水分吸收、光合作用、蛋白质和 DNA 合成等多种途径来影响植物生长，而更为重要的是自毒物质在根际土壤中的累积为根际病原菌提供了丰富的营养，加速其繁殖，从而导致连作障碍的发生。

对羟基苯甲酸已经被证实是多种植物产生的自毒物质，尤其在草莓和黄瓜上，对羟基苯甲酸在根系分泌物中含量最高、自毒作用最强。如果能加速连作土壤中对羟基苯甲酸的降解，将利于有效控制草莓和黄瓜连作障碍的发生。

发明内容

本发明的目的是提供一种高效降解自毒物质对羟基苯甲酸的细菌及其应用。

本发明是通过以下技术方案实现的：一种高效降解自毒物质对羟基苯甲酸的细菌，该菌株分类命名为致金色假单胞菌(Pseudomonas aureofaciens) Z-H2，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心( CGMCC )，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2017年7月26日，保藏编号：CGMCC No.14461。

该菌株的菌落及菌体特征为：在LB培养基上培养24h后，菌落颜色发红，圆形，有光泽，直径1-1.5mm，不透明,表面湿润；培养48h可见橙色色素产生并扩散在培养基里，继续培养后，菌落发粘，不易挑起；菌体呈杆状，单个或成对生长，不产芽孢，革兰氏染色为阴性。菌株显微图片如图1所示。

该菌株的生理生化特征为：氧化酶试验阳性、接触酶试验阳性、乙醇利用试验阴性、L-阿拉伯糖试验阳性、水解淀粉实验阴性、荧光色素阳性、明胶液化试验阳性、从蔗糖产生果聚糖试验阳性。

该菌株最适培养条件为：LB培养基：蛋白胨10 g/L，酵母粉5 g/L,氯化钠10 g/L，pH 7.2，温度30℃，121˚C灭菌20min。

该菌株可以用于制备微生物菌剂，应用时，培养CGMCC No.14461，得菌悬液，作为液态菌剂，浓度为2×10⁸cfu/ml。使用时，直接将100mL OD600值为1的菌液施加进植株根系土壤中即可。该菌液对植株无毒害作用。