[发明专利]一种肺癌实体瘤组织样本保存液

说明书

本发明公开了一种肺癌实体瘤组织样本保存液。本发明的样本保存液由胎牛血清、双抗P/S、HEPES和HBSS组成；其中，所述胎牛血清的终浓度为1‑5％(体积百分含量)；所述双抗P/S中的青霉素的终浓度为100‑200U/mL；所述双抗P/S中的链霉素的终浓度为100‑200μg/mL；所述HEPES的终浓度为8‑12mM；余量均为HBSS。利用本发明方法得到的肺癌原代细胞培养物可用于多种细胞水平的体外实验、二代测序、构建动物模型、构建细胞系等等。可以预见，这种培养方法和本发明所提供的样本保存液在肺癌的研究和临床诊断治疗领域具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种肺癌实体瘤组织样本保存液。

背景技术

肺癌是世界上发病率和死亡率最高的癌症，其中男性肺癌发病率和死亡率在所有恶性肿瘤中最高，而女性肺癌发病率和死亡率均为第二位。同时，肺癌发病增长率和死亡增长率在所有恶性肿瘤中最高。可以说肺癌是对人类健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。

尽管世界各国的科研和医疗机构对肺癌的病因以及发生发展过程的研究都有很大力度的投入，但是人类对这种疾病仍然知之甚少。肺癌是一种复杂疾病，其发生、发展是一个动态的过程，涉及到诸多信号分子相互作用，形成了一个复杂的分子调控网络，同时还受到外界环境因素的影响。肺癌的病因和发生发展过程有很强的个体差异性，不能一概而论。因此将肺癌实体瘤原代细胞培养物作为模型进行个体化精准研究是肺癌研究领域乃至肺癌诊断治疗领域的趋势。

术中所取的新鲜肿瘤组织样本由于不能即刻进行原代细胞的分离，因此好的样本保存液对于有样本离体后短时间内维持样本中细胞的活性至关重要，可以说这是影响原代肿瘤细胞分离与培养效果中的一个重要环节。

发明内容

为了有效解决上述技术问题，本发明提供了一种新的肺癌实体瘤原代细胞培养技术及配套试剂，本发明采用了一种新的样本保存液，其可在样本离体后短时间内维持样本中细胞的活性。

第一方面，本发明要求保护一种肺癌实体瘤组织样本保存液。

本发明所提供的肺癌实体瘤组织样本保存液由胎牛血清、双抗P/S、HEPES和HBSS(Hank's平衡盐溶液)组成。

其中，所述胎牛血清在所述样本保存液中的终浓度为1-5％(如2％，％表示体积百分含量)；所述双抗P/S中的青霉素在所述样本保存液中的终浓度为100-200U/mL(如100U/mL)；所述双抗P/S中的链霉素在所述样本保存液中的终浓度为100-200μg/mL(如100μg/mL)；所述HEPES在所述样本保存液中的终浓度为8-12mM(如10mM)；余量均为HBSS。

在本发明的具体实施例中，所述胎牛血清的品牌货号为Gibco#16000-044；所述双抗P/S的品牌货号为Gibco#15140122；所述HEPES的品牌货号为Gibco#15630080；所述HBSS的品牌货号为Gibco#14170161。

所述样本保存液存在形式可为两种：

其一，所述样本保存液为由所述胎牛血清、所述双抗P/S、所述HEPES和所述HBSS(Hank's平衡盐溶液)混合而成的溶液。

所述样本保存液配制好后4℃可保存1个月。

其二，所述样本保存液中的各组分单独存在，使用时按照配方进行配制。

第二方面，本发明要求保护所述样本保存液在保存肺癌实体瘤组织中的应用。

第三方面，本发明要求保护一种保存肺癌实体瘤组织的方法。

本发明所体用的保存肺癌实体瘤组织的方法，具体可包括如下步骤：将刚刚离体的肺癌实体瘤组织(如手术过程中从患者体内刚取出的新鲜肺癌实体瘤组织)置于前文所述的样本保存液中保存，保存时间为2小时以内。