[发明专利]一种测定罗汉果中的罗汉果甜苷IIA含量的方法

权利要求书

1.一种测定罗汉果中的罗汉果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）罗汉果样品前处理：

1）烘干：将罗汉果样品洗净并于55℃～65℃下烘干，得到干燥的罗汉果样品；

2）粉碎：将干燥的罗汉果样品粉碎，得到罗汉果粉末；

3）超声波提取：将罗汉果粉末放入甲醇中超声波提取罗汉果甜苷IIA，超声波提取的工艺参数为：液料比为0.015g/ml～0.025g/ml，超声功率为120W，频率为35KHZ～45KHZ，时间为35min～45min，得到超声波提取液；

4）过滤：用0.40μm～0.50μm微孔膜过滤超声波提取液，得到待测样品；

（2）制备对照品溶液：将罗汉果甜苷IIA溶于甲醇中制备得到的罗汉果甜苷IIA对照品溶液；

（3）HPLC-MS法测定待测样品中罗汉果甜苷IIA含量：

1）液相色谱柱工艺参数：进样量为1μL，柱温为20℃～30℃，以甲醇和水做流动相，流速为0.8mL.min^-1～1.2mL.min^-1，洗脱模式为二元梯度洗脱，以55%甲醇等度洗脱；

2）质谱工艺参数：选择离子监控模式，离子源为电喷雾离子源，扫描模式为正离子模式，干燥气温度为380℃～420℃，干燥气流速为13L.min^-1～18L.min^-1，雾化气压力为220kPa～240kPa,毛细管电压为3.3kV～3.7kV, 保留时间为34.0min。

2.根据权利要求1所述的一种测定罗汉果中的罗汉果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，所述步骤（1）中将干燥的罗汉果样品粉碎至350目～400目，得到罗汉果粉末。

3.根据权利要求1所述的一种测定罗汉果中的罗汉果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，所述步骤（1）中先用0.40μm～0.50μm微孔膜过滤超声波提取液，取其滤液，用大孔树脂D101对滤液进行吸附，再用50%～70%的酒精水溶液对滤液进行梯度洗脱，最后将洗脱液减压浓缩，得到待测样品。

4.根据权利要求1所述的一种测定罗汉果中的罗汉果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，所述步骤（3）中设定保留时间偏移范围为±0.075min。

5.根据权利要求1所述的一种测定罗汉果中的罗汉果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，所述步骤（3）中的色谱柱为ZORBAX SB-Aq液相色谱柱。

6.根据权利要求1所述的一种测定罗汉果中的罗汉果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，所述步骤（3）中质谱分析过程中选择离子为[M+ Na] ⁺(m/z)823.20。

7.根据权利要求1所述的一种测定罗汉果中的罗汉果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，所述步骤（3）中液相色谱柱工艺参数：进样量为1μL，柱温为25℃，以甲醇和水做流动相，流速为1.0mL.min^-1，洗脱模式为二元梯度洗脱，以55%甲醇等度洗脱。

8.根据权利要求1所述的一种测定罗汉果中的罗汉果甜苷IIA含量的方法，其特征在于，所述步骤（3）中质谱工艺参数：选择离子监控模式，离子源为电喷雾离子源，扫描模式为正离子模式，干燥气温度为400℃，干燥气流速为15L.min^-1，雾化气压力为230kPa,毛细管电压为3.5kV, 保留时间为34.0min。